小鼠血清CX43蛋白和叢生蛋白作為輻射生物劑量計(jì)的評(píng)估.pdf

1、隨著核能、核工業(yè)的發(fā)展以及恐怖襲擊日益復(fù)雜的形勢(shì)下，人們受到核輻射的風(fēng)險(xiǎn)也在逐年增加。在應(yīng)對(duì)突發(fā)核輻射事件中，快速、檢測(cè)方便、高通量的生物劑量計(jì)有著極其重要的應(yīng)用價(jià)值，早期生物劑量計(jì)也因此成為人們一直以來(lái)關(guān)注的研究熱點(diǎn)。鑒于已有臨床生物劑量計(jì)難以滿足以上要求，各種新的可用于生物劑量計(jì)的輻射敏感標(biāo)志物被研究。生物劑量計(jì)在蛋白質(zhì)層面上的研究近年來(lái)被人們重視。本論文研究了急性全身γ照射后小鼠血清中縫隙連接蛋白Connexin43（CX43）以

2、及叢生蛋白Clusterin（CLU）隨劑量及時(shí)間的變化關(guān)系。探究他們作為一種新的能夠應(yīng)對(duì)緊急突發(fā)核事故的早期生物劑量計(jì)的可行性。主要得到以下兩個(gè)結(jié)論：
　　1、利用表面等離激元共振(SPR)生物傳感器探測(cè)小鼠輻照后血清中CX43蛋白隨劑量和時(shí)間的變化關(guān)系。包覆 CX43抗體的SPR生物傳感芯片能夠特異性地檢測(cè)出標(biāo)準(zhǔn)品及樣品中的CX43蛋白。在標(biāo)準(zhǔn)品中最低檢測(cè)限為5ng/L，與采用雙抗體夾心技術(shù)的ELISA方法相當(dāng)。用該傳感器芯片

3、檢測(cè)經(jīng)γ射線照射后小鼠血清樣品中的CX43含量隨時(shí)間的變化關(guān)系發(fā)現(xiàn)照射后小鼠血清內(nèi)的CX43蛋白含量隨時(shí)間呈先升高后降低的趨勢(shì)，在3h左右達(dá)到最高值。檢測(cè)3h時(shí)刻經(jīng)不同劑量60Coγ射線照射后小鼠的血清樣品，結(jié)果顯示0.6 Gy劑量的γ照射即可引起小鼠血清CX43的高表達(dá)。在0～2.4Gy范圍內(nèi)，小鼠血清CX43含量與劑量呈線性關(guān)系。Western Blot定性檢測(cè)結(jié)果與SPR一致。而當(dāng)劑量增加至3Gy時(shí)CX43含量開(kāi)始下降，但仍然明顯

4、高于正常對(duì)照組。因此在0～2.4Gy區(qū)間內(nèi)，該標(biāo)識(shí)物有望發(fā)展成為一種新的早期輻射生物劑量計(jì)。
　　2、鑒于目前 SPR生物傳感器在通量低、需要反復(fù)再生以及其他一些方面的不足和缺陷，本論文利用了另一種免疫分析方法，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）技術(shù)研究小鼠血清CLU蛋白作為輻射生物劑量計(jì)的可行性探究。利用該技術(shù)能夠迅速、高通量地檢測(cè)小鼠輻照后血清中CLU蛋白隨劑量和時(shí)間的變化關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果顯示，ELISA試劑盒最低檢測(cè)限為6.