臍橙炭疽病原菌生物學(xué)特性及防治藥物的篩選研究.pdf

1、贛州是全國最大的臍橙主產(chǎn)區(qū)之一。近年來隨著種植面積的不斷擴(kuò)大及氣候的復(fù)雜多變,導(dǎo)致多地臍橙果園大面積感染炭疽病,嚴(yán)重影響了臍橙產(chǎn)量和品質(zhì)。在嚴(yán)峻防治形勢面前,專門針對臍橙炭疽病的研究是必要和緊迫的。
　　 本研究從江西贛州的六個臍橙果園采集病葉樣本,經(jīng)過常規(guī)組織分離、純化培養(yǎng)和科赫驗證,得到6株致病菌菌株。根據(jù)采集地不同,分別命名為AYB4、XFB8-1、LNB21-2、HJA9、GXA5-1、LNB11。對6株致病菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)

2、和菌落特征鑒定,按照Sutton(1980)分類系統(tǒng)及魏景超鑒定手冊,認(rèn)為6株菌株為膠孢炭疽菌C.gloeosporioides。毒力測試篩選出致病力最強(qiáng)的兩株菌株GXA5-1,LNB21-2,對其進(jìn)行了生物學(xué)特性和生理生化特性測定。對菌株GXA5-l進(jìn)行化學(xué)藥物和生防菌防治試驗。試驗結(jié)果有以下幾點(diǎn):
　　 1六株致病菌形態(tài)和菌落特征
　　 1.1菌落特征
　　 28℃,PDA培養(yǎng)六天,菌絲呈現(xiàn)白色或黃白色也有灰

3、色,各菌落邊緣整齊,氣生菌絲稀疏至茂密發(fā)達(dá),呈絨毛狀。菌落背面有橘色或紫色或墨綠色色素分泌,有時可見清晰同心輪紋。
　　 1.2形態(tài)特征
　　 PDA培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)6天,在顯微鏡下可觀察到分生孢子呈圓柱形、長橢圓形或新月形、單孢、無色、菌絲無色,有的具有隔膜及分枝.附著孢褐色、圓形。各菌株分生孢子大小11.74-22.41×2.86-6.29μm。
　　 菌株間培養(yǎng)性狀存在差異,未見有性世代。
　　

4、2菌株GXA5-l,LNB21-2生物學(xué)特性
　　 采用孢子懸浮液創(chuàng)傷接種法,進(jìn)行菌株毒力測試結(jié)果,篩選出致病力強(qiáng)的兩株菌株GXA5-1,LNB21-2,對其進(jìn)行生物學(xué)特性鑒定,結(jié)果如下:
　　 2.1溫度對菌株的影響在PDA上,菌絲生長和孢子萌發(fā)的適溫為23℃-28℃。
　　 2.2濕度對菌株的影響
　　 28℃、PDA培養(yǎng),濕度對菌絲生長未見有顯著性差異,但是當(dāng)相對濕度大于75％時,有利于分生孢子的萌

5、發(fā)。
　　 2.3 pH值對菌株的影響
　　 PDA培養(yǎng),28℃,菌絲在pH3-9均能生長,孢子也能萌發(fā)。但pH6時,菌落直徑最大。在pH5、6時,分生孢子的萌發(fā)率為100％。
　　 2.4光照對菌株的影響
　　 PDA培養(yǎng),28℃,光照對菌落直徑和分生孢子萌發(fā)影響不顯著。
　　 2.5碳源對菌株的影響
　　 28℃,在含有葡萄糖、果糖、乳糖等6種碳源的查彼培養(yǎng)基上培養(yǎng)六天,菌株在含有葡萄

6、糖的培養(yǎng)基上菌落直徑最大,葡萄糖能顯著促進(jìn)菌絲生長。
　　 2.6氮源對菌株的影響
　　 28℃,在含有硝酸鉀、酸水解干酪素、氯化銨等10種不同氮源的查彼培養(yǎng)基上培養(yǎng)六天,菌株能很好利用硝酸鉀、酸水解干酪素的培養(yǎng)基,在含有硝酸鉀培養(yǎng)基上菌落直徑最大。
　　 2.7生理生化鑒定
　　 2株菌都能分泌過氧化氫酶、氧化酶、淀粉酶、漆酶、明膠酶等胞外酶,但不產(chǎn)H:S。
　　 3化學(xué)藥物對菌株GXA5-1防

7、治
　　 采用生長速率法,測定咪鮮胺(25％)、咪鮮胺錳鹽(5096)、苯醚·甲環(huán)唑(10％)等11種化學(xué)藥物對菌株GXA5-1的防治效果。測試結(jié)果表明,咪鮮胺(25％)抑制菌絲生長和抑制孢子萌發(fā)的EC50最小,EC50分別為0.021mg/mL,0.004 mg/mL,有在大田試驗中推廣的價值。
　　 4生物防治菌對GXA5-1的防治
　　 采用杯碟法測定枯草芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌、熒光假單孢菌、木霉菌、瓦克