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文檔簡介
1、近年來,表面增強(qiáng)拉曼光譜(Surface Enhanced Raman Spectroscopy, SERS)因其具有非侵入性、非破壞性、高靈敏性等特點而被廣泛應(yīng)用于生物研究領(lǐng)域。膠體金免疫層析法(Immunochromatographic Assay, ICA)作為一種簡單快速、低成本、適合現(xiàn)場快速篩選的免疫分析的手段,已成為食品安全中的重要檢測手段。但目前發(fā)展的表面拉曼增強(qiáng)免疫分析方法存在操作復(fù)雜(基底的制備、處理)、重現(xiàn)性低(拉曼
2、信號不均勻)、成本高(儀器設(shè)備價格昂貴)等不足。在此基礎(chǔ)上,我們提出了一種使用便攜式表面增強(qiáng)拉曼光譜儀的簡便、快速、低成本、超靈敏的表面增強(qiáng)拉曼光譜免疫層析技術(shù)(SERS-ICA)檢測鹽酸克倫特羅,結(jié)合了SERS的高靈敏性與ICA快速簡便性,以硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrane, NC)為基底,并通過簡單易行的種子生長法合成了粒徑均勻、分散性好、核殼結(jié)構(gòu)的Au@Ag復(fù)合納米粒子作為拉曼探針,對其性質(zhì),形貌,拉曼
3、增強(qiáng)活性進(jìn)行了表征,通過條件的優(yōu)化,取得到優(yōu)異的檢測結(jié)果。
具體內(nèi)容如下:我們成功制備了35nm的金納米粒子,拉曼標(biāo)記物對巰基苯甲酸(MBA)通過Au-S鍵與金納米粒子相連,并通過還原硝酸銀制備了核殼夾心結(jié)構(gòu)的、高拉曼增強(qiáng)信號的AuMBA@Ag探針,當(dāng)銀殼層厚度為5nm時,Au@Ag復(fù)合納米粒子的拉曼增強(qiáng)效果最好。在 AuMBA@Ag探針表面連上抗體,應(yīng)用便攜式表面增強(qiáng)拉曼光譜儀和課題組制備的鹽酸克倫特羅(Clenbutero
4、l,CL)多克隆抗體和包被抗原,測定檢測線(T線)上拉曼標(biāo)記物(MBA)的拉曼信號對CL進(jìn)行定量分析。靈敏度為0.02 ng mL-1,檢出限為0.24 pg mL-1,T線上拉曼信號的RSD在4.3-8.7%,并且評價了方法的重現(xiàn)性和特異性等。
我們將SERS和ICA有機(jī)結(jié)合,建立的新型SERS-ICA法不僅成本低、易操作、簡便、快捷檢測鹽酸克倫特羅,我們期望建立一系列不同拉曼增強(qiáng)探針(金納米棒、金納米花等)的SERS-IC
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