釀酒葡萄籽中原花青素的提取和抗氧化性研究.pdf

1、原花青素是葡萄籽多酚的主要活性物質(zhì)，現(xiàn)代研究表明，原花青素不僅具有高效的抗氧化活性，而且還有保護(hù)心血管、抗癌抗輻射、皮膚保健及美白等功效。本文對(duì)葡萄籽中原花青素的提取工藝、分離純化及抗氧化活性進(jìn)行以下幾個(gè)方面的研究：
　　 以兒茶素為標(biāo)準(zhǔn)品，采用濃硫酸-香草醛法測(cè)定原花青素含量；以原花青素的提取量為指標(biāo)，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確立影響原花青素提取量的相關(guān)因素，并通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定提取的最佳條件。對(duì)原花青素進(jìn)行超聲波助提實(shí)驗(yàn)，篩選到提取的最

2、佳工藝條件為：超聲功率80W、料液比1:35、超聲時(shí)間30 min、乙醇濃度50％，原花青素含量為55.728 mg/g；對(duì)原花青素進(jìn)行微波助提實(shí)驗(yàn)，篩選到提取的最佳工藝條件為：料液比1:25、微波功率115 W、微波時(shí)間40 s、乙醇濃度80％，原花青素含量為106.936 mg/g；對(duì)原花青素進(jìn)行酶解助提實(shí)驗(yàn)，篩選到提取的最佳工藝條件為：酶解溫度45℃、pH4.0、酶解時(shí)間1.0 h、酶液濃度100u/mg，原花青素含量為87.51

3、3 mg/g。
　　 通過(guò)靜態(tài)吸附、解吸試驗(yàn)，從5種不同極性的大孔樹(shù)脂中篩選得到，AB-8樹(shù)脂的吸附、解吸效果最好，吸附率和解吸率分別達(dá)到78.00％、92.42％。選用AB-8樹(shù)脂對(duì)動(dòng)態(tài)吸附條件進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，確定濃度為3 mg/mL的原花青素以3 BV/h的流速流經(jīng)樹(shù)脂柱時(shí)，AB-8的吸附率最高可達(dá)到78.19％；對(duì)解吸條件進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，用100 mL濃度為30％的乙醇溶液以2 BV/h的流速對(duì)吸附飽和后的樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，原花青

4、素的解吸率高達(dá)92.37％。將10％-50％乙醇洗脫液進(jìn)行凍干處理，對(duì)原花青素凍干粉的純度進(jìn)行測(cè)定，得到該混合物的純度為85.16％。
　　 采用四種不同處理樣品：原花青素粗提液(GSP0)、25％乙醇洗脫液(GSP1)、50％乙醇洗脫液(GSP2)、50％乙醇洗脫液凍干粉(GSP3)，分別進(jìn)行抗氧化活性實(shí)驗(yàn)的研究。
　　 1.在清除HO·的實(shí)驗(yàn)中，以濃度相同的Vc溶液為對(duì)照，檢測(cè)四種樣品的抗氧化性，結(jié)果表明：不同樣品清

5、除率的大小依次是GSP3、Vc、GSP2、GSP1、GSP0，當(dāng)濃度大于2.3 mg/mL時(shí)，Vc溶液的清除率大于GSP3。
　　 2.在清除O2·-的實(shí)驗(yàn)中，原花青素對(duì)O2·-的清除率與濃度呈正相關(guān)，不同樣品清除率的大小依次是：GSP3、GSP2、GSP1、GSP0、Vc。
　　 3.在測(cè)定還原力的實(shí)驗(yàn)中，由700 nm下測(cè)得吸光值曲線可以看出，還原力與原花青素的濃度呈正比，且它們之間還原力大小關(guān)系是：GSP0>GSP

6、1>GSP3>GSP2>Vc。
　　 4.在抗油脂氧化能力的實(shí)驗(yàn)中，與未添加抗氧化劑的樣品相比，原花青素有一定的抗油脂氧化能力，動(dòng)物油、植物油的過(guò)氧化值分別為64.22 meq/kg(動(dòng)物油對(duì)照為144.83meq/kg)、433.31 meq/kg(植物油對(duì)照為573.72 meq/kg)，且與植物油相比，原花青素對(duì)動(dòng)物油的保護(hù)作用更明顯。
　　 5.利用電子順磁共振技術(shù)測(cè)定原花青素提取液對(duì)DPPH·清除率，不同樣品對(duì)