光纖傳感結(jié)合微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室光譜法測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S含量.pdf

1、目的：硫化氫（hydrogen sulfide，H2S）是一種有刺激性氣味并污染環(huán)境的有毒氣體。但近年來研究表明，H2S是繼NO和CO之后的第三種氣體信號(hào)分子，能夠自由的通過細(xì)胞膜，是一種神經(jīng)調(diào)質(zhì)，在哺乳動(dòng)物體組織內(nèi)和細(xì)胞內(nèi)起到了許多的生理和病理作用，因此，受到科學(xué)界廣泛關(guān)注。本研究旨在探索建立在線、靈敏、快速測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S的定量分析方法，為有效地測(cè)定哺乳動(dòng)物體內(nèi)H2S含量提供參考依據(jù)和實(shí)施案例。
　　方法：采用Na2S

2、作為H2S供體，將光纖傳感技術(shù)與微順序注射-閥上實(shí)驗(yàn)室（Micro Sequential Injection lab-on-valve，μSIA-LOV）相結(jié)合，在進(jìn)樣體積為50μL的條件下分別采用鈣黃綠素-銅（Ⅱ）體系熒光恢復(fù)法、熒光素汞熒光猝滅法和亞甲藍(lán)法測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S含量，并對(duì)試劑濃度、試劑用量、反應(yīng)pH值、反應(yīng)時(shí)間、產(chǎn)物穩(wěn)定性和檢測(cè)流速等分析條件進(jìn)行探索和優(yōu)化。
　　結(jié)果：（1）鈣黃綠素-銅（Ⅱ）體系熒光恢復(fù)法：

3、以200μL pH=8.0的磷酸鹽緩沖液為載液，1.0×10-5 mol/L鈣黃綠素50μL，1.0×10-5 mol/L硫酸銅50μL；測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S的線性范圍為1.0×10-5mol/L~6.0×10-5mol/L，進(jìn)樣體積50μL，檢測(cè)流速30μL/s，精密度為3.3％，檢測(cè)限為5.4×10-6 mol/L，供試品中H2S含量為4.1×10-5mol/L，平均回收率為91.1%，分析頻率為40樣/h。（2）熒光素汞熒光猝

4、滅法：以100μL0.1mol/L NaOH溶液為載液，1.0×10-5 mol/L熒光素汞50μL，進(jìn)樣體積50μL，檢測(cè)流速25μL/s，測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S線性范圍為5.0×10-6~1.0×10-4 mol/L，精密度為3.8%，檢出限為4.1×10-7 mol/L，供試品中H2S含量為6.6×10-5mol/L，平均回收率為98.2%，分析頻率45樣/h。（3）亞甲藍(lán)法：在酸性條件下，以100μL水為載液，0.05mol/

5、L醋酸鋅50μL，1.0×10-3 mol/L N,N-二甲基對(duì)苯二胺鹽酸鹽50μL，0.1 mol/L的氯化鐵50μL，反應(yīng)生成亞甲藍(lán)在663.49nm處測(cè)定吸光度，進(jìn)樣體積50μL，檢測(cè)流速5μL/s，測(cè)定大鼠腸灌流液中H2S的線性范圍為2.0×10-5~4.0×10-4 mol/L，精密度為1.9%，檢出限為4.7×10-6 mol/L，供試品中H2S含量為1.62×10-4mol/L，平均回收率為101.7%，分析頻率20樣/h