紫甘薯花色苷雙酶法提取純化工藝與降血糖功能及機(jī)理研究.pdf

1、隨著食用色素的廣泛使用,人們對(duì)合成色素的危害了解越來越多,天然來源的食用色素越來越受到人們的青睞。而花青素類的色素著色效果好、色澤鮮艷,近年來被廣泛應(yīng)用于食品行業(yè)。在植物體內(nèi)花青素常通過糖苷鍵與糖結(jié)合以花色苷的形式存在?；ㄉ詹粌H可以作為食用色素使用,而且具有多種生理功效,也可作為食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑來使用。
　　紫甘薯,作為一種富含花色苷的作物,近年來受到越來越多人們的喜愛。已成為人們餐桌上一種常見的食物。本研究以紫甘薯為原料,提取紫

2、甘薯花色苷并對(duì)其進(jìn)行純化;進(jìn)而對(duì)它的降血糖功能及機(jī)理進(jìn)行研究。
　　首先,確定采用高效、無污染的酶解法提取紫甘薯花色苷,通過單酶法和雙酶法提取的花色苷得率進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),利用雙酶法提取紫甘薯花色苷明顯優(yōu)于單一酶法的提取效果,最終確定采用獨(dú)創(chuàng)的雙酶法提取紫甘薯花色苷。通過單因素試驗(yàn)和四因素三水平正交試驗(yàn),得出紫甘薯花色苷雙酶法提取的最佳工藝條件為:真菌α-淀粉酶0.30％,酸性果膠酶0.05%,酶解pH4.0,酶解溫度50℃。在此條件

3、下,花色苷得率為249mg/100g,總糖含量為10.37mg/mL,還原糖含量為.25mg/mL。
　　采用AB-8,D101,XAD三種不同的大孔樹脂對(duì)紫甘薯花色苷的動(dòng)態(tài)吸附和解析效果進(jìn)行了研究,選取吸附率和解析率都較高的AB-8大孔樹脂探討了紫甘薯花色苷的純化工藝,通過對(duì)初提液純化時(shí)吸附濃度、解析液濃度、樣液酸度和解析液的酸度,吸附及解析速率的試驗(yàn)結(jié)果分析,最終確定AB-8大孔樹脂最佳純化工藝條件為:吸附濃度為26.57mg

4、/100mL,紫甘薯花色苷粗提液酸度為pH2.0,解析液為60%乙醇溶液,解析液酸度為pH3,吸附速率為1mL/mi,解析速率為2mL/min。在此條件下,花色苷濃縮液,花色苷得率為295mg/100g,是純化前的118.5%,總糖含量為0.18g/100g,還原糖含量0.07g/100g,色價(jià)也高達(dá)55.2。顯著高于國(guó)內(nèi)其他提取方法得到的紫甘薯花色苷的色價(jià)。
　　為了研究紫甘薯花色苷的降血糖活性及機(jī)理,進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。將試驗(yàn)小

5、白鼠分為空白對(duì)照組,紫甘薯花色苷高、中、低劑量組,陽性組,模型組,分別對(duì)正常小鼠的餐后血糖,高血糖小鼠的空腹血糖和高血糖小鼠的血清中MDA、SOD、GSH-Px三個(gè)抗氧化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,對(duì)胰臟病理切片進(jìn)行觀察。
　　首先,通過各實(shí)驗(yàn)組中正常小鼠餐后血糖的比較,發(fā)現(xiàn)紫甘薯花色苷高(75mg/kg)、中(50mg/kg)劑量組與阿卡波糖陽性藥組均可顯著抑制正常小鼠餐后血糖的升高且與空白對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.01),根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)

6、報(bào)道,推斷紫甘薯花色苷與阿卡波糖相似也是通過抑制體內(nèi)α-葡萄糖苷酶活性來達(dá)到降血糖的功效。
　　采用四氧嘧啶造成高血糖小鼠模型,通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定高血糖小鼠的各實(shí)驗(yàn)組給藥劑量。給藥30天后,通過測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組(空白對(duì)照組,模型對(duì)照組,紫甘薯花色苷高、中、低劑量組,格列本脲陽性組)小鼠空腹血糖,進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)紫甘薯高劑量組(50mg/kg)具有顯著降糖效果,與模型組相比有極顯著差異(P<0.01);中劑量組(25mg/kg)與模型組比較具

7、有顯著相差異(0.01　　對(duì)各組小鼠血清中的SOD、MDA、GSH-Px三個(gè)抗氧化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),紫甘薯花色苷高劑量和中劑量組血清中的 MDA含量比模型組顯著下降(P<0.01),SOD、GSH-Px含量比模型組顯著上升(P<0.01),而低劑量組的SOD、MDA、GSH-Px與模型組相比也有顯著性差異(0.01