負(fù)載SOD的γ-聚谷氨酸水凝膠的制備及其在創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用.pdf

1、皮膚具有保護(hù)、代謝和感覺(jué)等重要的功能。皮膚創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程涉及諸多生理生化反應(yīng)，其中各類(lèi)氧化還原反應(yīng)起著重要作用。特別是慢性創(chuàng)傷中，經(jīng)常會(huì)因氧化損傷造成創(chuàng)傷長(zhǎng)期不愈。因此，研究制備具有抗氧化損傷的新型創(chuàng)傷修復(fù)材料具有重要意義。
　　 本研究制備了γ-聚谷氨酸(γ-PGA)水凝膠，并通過(guò)化學(xué)及物理方式負(fù)載超氧化物歧化酶(SOD)，研究其在創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用。本文研究了利用?；撬嵬?PGA生成磺化聚谷氨酸(γ-PGA-S)，以乙二醇二縮

2、水甘油醚為交聯(lián)劑，生成磺化γ-PGA水凝膠，通過(guò)物理包埋的方式負(fù)載SOD，應(yīng)用于糖尿病大鼠創(chuàng)傷模型中。由NMR譜圖可知，制備的磺化γ-PGA磺化比例約為44.6％。磺化凝膠體系溶脹率隨著磺化γ-PGA比例上升而提高，并隨著溶液體系的pH下降而溶脹性隨之下降。酶活力檢測(cè)表明釋放后的SOD仍具有較高活性，證明負(fù)載方式未造成SOD失活。通過(guò)體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞抗氧化實(shí)驗(yàn)，證明凝膠體系具有較好的細(xì)胞相容性，并隨著磺化比例提升，抗氧化性能隨之提

3、升。糖尿病大鼠創(chuàng)傷模型實(shí)驗(yàn)，直接證明負(fù)載SOD的磺化，γ-PGA凝膠體系具有很好的抗氧化損傷性能，能促進(jìn)創(chuàng)面快速愈合。表明此類(lèi)γ-PGA水凝膠可用于慢性創(chuàng)傷修復(fù)，可以作為抗氧化水凝膠創(chuàng)傷敷料。
　　 本論文還利用化學(xué)修飾方法，將γ-PGA側(cè)鏈羧基活化，同SOD的賴(lài)氨酸殘基氨基進(jìn)行反應(yīng)，生成γ-PGA修飾的超氧化物歧化酶(SOD-γ-PGA)。并利用胱胺作為交聯(lián)劑，制備化學(xué)鍵合SOD的γ-PGA水凝膠。通過(guò)檢測(cè)SOD-γ-PGA酶

4、活力及酶比活力保持率，表明所選用反應(yīng)方法條件溫和，反應(yīng)專(zhuān)一，未造成SOD變性失活。酸性溶液環(huán)境中，反應(yīng)后的SOD-γ-PGA較純SOD具有更好的活性保持能力。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明，凝膠體系無(wú)細(xì)胞毒性。凝膠體系在體外細(xì)胞抗氧化實(shí)驗(yàn)中具有較好的抗氧化損傷效果。
　　 總之，本研究通過(guò)物理及化學(xué)方式制備了負(fù)載SOD的γ-PGA水凝膠體系，通過(guò)對(duì)凝膠溶脹性能，體外釋放，酶活性檢測(cè)，細(xì)胞抗氧化及動(dòng)物創(chuàng)傷模型等檢測(cè)，證明負(fù)載SOD的γ-PG