汞燈作為活化光源的三維超高分辯隨機(jī)光學(xué)重建熒光顯微鏡研究.pdf

1、隨機(jī)光學(xué)重建熒光顯微鏡是一種新型的能打破光學(xué)衍射極限的超高分辨顯微鏡,在細(xì)胞生物學(xué)、祌經(jīng)生物學(xué)以及材料化學(xué)等多領(lǐng)域有巨大的應(yīng)用潛力,但它較為復(fù)雜的搭建光路、昂貴的價(jià)格成為普及使用的阻力。本文描述了一種用汞燈作為活化光源的三維超高分辨熒光顯微鏡的新型實(shí)現(xiàn)方法。該方法是基于一臺(tái)常規(guī)倒置熒光顯微鏡的改造,我們保留了其汞燈作為超分辨系統(tǒng)的活化光源代替一般使用的激光光源,因?yàn)榛罨庠吹墓β拭芏纫蟛桓?1-100 W/cm2),汞燈不僅可以勝任并

2、且具有光譜寬、價(jià)格便宜、通用等優(yōu)勢(shì)。同時(shí)加入不昂貴的半導(dǎo)體激光器作為激發(fā)光源,用高功率密度實(shí)現(xiàn)亮暗狀態(tài)的快速轉(zhuǎn)換,減少成像所需時(shí)間。最終實(shí)現(xiàn)了一個(gè)價(jià)格便宜、光路簡(jiǎn)單、并且達(dá)到了40 nm的橫向分辨率和100 nm的軸向分辨率的超高分辨熒光顯微鏡,并驗(yàn)證了其在細(xì)胞成像上的可行性。同時(shí)實(shí)現(xiàn)方法對(duì)于常規(guī)顯微鏡的改造較小,并且文章詳細(xì)的敘述了完整的硬件搭建、軟件使用、細(xì)胞成像的流程,可以作為生物實(shí)驗(yàn)室甚至學(xué)生實(shí)驗(yàn)自己搭建超分辨顯微鏡的參考教程。