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文檔簡介
1、目前,以豬皮為原料制備膠原基質(zhì)敷料用于皮膚損傷修復(fù)已成為研究熱點(diǎn)。但傳統(tǒng)方法制得的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(ADM)存在滲透性差、抗菌性能低、生物相容性差等缺點(diǎn),這嚴(yán)重限制了脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料在臨床的廣泛應(yīng)用。
針對上述不足,本論文結(jié)合臨床對創(chuàng)面敷料的要求以及豬皮的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),以組織工程原理為指導(dǎo),在前期實(shí)驗室研究和目前最新研究成果基礎(chǔ)上,采用新的工藝處理鹽腌豬皮,徹底去除毛根鞘等纖維間質(zhì),提高膠原基質(zhì)滲透性,復(fù)合羧甲基殼聚糖和硫酸軟骨素
2、等天然多糖,并用戊二醛交聯(lián),改善敷料的抗菌性能和生物活性,得到高性能脫細(xì)胞真皮基質(zhì)抗菌敷料。本文的重點(diǎn)研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
(1)首先對脫細(xì)胞真皮基質(zhì)制備工藝進(jìn)行研究,研究表明:經(jīng)角蛋白酶處理得到的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的透水汽性能和孔隙率要優(yōu)于傳統(tǒng)方法制得的基質(zhì)的性能,因此,在脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備過程中,要增加角蛋白酶處理,具體工藝路線為:
鹽腌豬皮→浸水→脫脂→堿膨脹→消除堿膨脹→角蛋白酶處理→二次酶處理→PBS液清洗→
3、封裝
(2)角蛋白酶用量對脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的透水汽性能、孔隙率和拉伸強(qiáng)度有一定影響:隨著角蛋白酶用量的增加,基質(zhì)的透水汽性能、孔隙率不斷提高,拉伸強(qiáng)度有所降低,但降低幅度不大,能夠在一定程度上維持膠原纖維結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定,這表明角蛋白酶處理技術(shù)基本實(shí)現(xiàn)了改善脫細(xì)胞真皮基質(zhì)透水氣性能和滲透性的預(yù)期目的。從保證基質(zhì)的機(jī)械性能和成本考慮,將角蛋白酶的用量定為0.3%。
(3)在脫細(xì)胞真皮基質(zhì)上復(fù)合羧甲基殼聚糖,研究羧甲基殼聚糖對基
4、質(zhì)抗菌性能的影響,為制備抗菌敷料提供可靠依據(jù)。抑菌實(shí)驗結(jié)果表明:與常規(guī)基質(zhì)相比,復(fù)合羧甲基殼聚糖后基質(zhì)的抑菌率增加,這說明基質(zhì)的抗菌性能得到一定程度改善,羧甲基殼聚糖對基質(zhì)的抗菌性能有重要影響。
(4)在脫細(xì)胞真皮基質(zhì)上交聯(lián)復(fù)合天然多糖,研究交聯(lián)復(fù)合對基質(zhì)拉伸強(qiáng)度、體外降解時間等理化性能的影響。實(shí)驗結(jié)果表明:交聯(lián)復(fù)合羧甲基殼聚糖、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素后,基質(zhì)的拉伸強(qiáng)度、透水汽速率、體外降解時間和孔隙率增加。
(5)根
5、據(jù)以上(1)、(2)、(3)、(4)的研究結(jié)果和組織工程學(xué)原理,結(jié)合敷料的性能要求,制備了高性能脫細(xì)胞真皮基質(zhì)抗菌敷料,并對敷料的主要性能做相關(guān)檢測。結(jié)果表明:經(jīng)戊二醛交聯(lián)后的敷料顏色微黃,毛孔可見,表面平細(xì)光滑,柔軟有彈性,無肉眼可見雜物;掃描電鏡觀察顯示:膠原纖維的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)疏松,多孔結(jié)構(gòu)豐富,適合細(xì)胞增殖和血管化;拉伸強(qiáng)度為10.66MPa,約是純膠原膜的5倍,拉伸強(qiáng)度較好,能夠滿足臨床對敷料的要求。透水汽速率為3640g·m-2·
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