含S-S聚合物的設計、合成及基因轉染性能研究.pdf

1、作為病毒載體的替代品，陽離子聚合物型基因載體在基因治療方面顯現出了很大的潛力，它可以與特定基因結合形成基因復合物，在內吞作用下進入細胞從而實現基因運送。在本論文中，我們設計了兩種陽離子聚合物型基因載體:含二硫鍵的聚（β-氨基酯）(PBAE)和羥基化聚乙烯亞胺(PEI)。
　　二硫鍵在細胞外相對穩(wěn)定，而在細胞質內由于存在較高濃度的谷胱甘肽，二硫鍵能夠快速的裂開表現出一種響應機制。據此我們在設計聚（β-氨基酯）時，首先將二硫鍵引入雙丙

2、烯酸酯單體中，然后通過其與氨基醇的交聯，制備出64種含有二硫鍵的聚(β-氨基酯)。在進行了基因轉染和細胞毒性等相關實驗后，我們篩選出四個轉染表現很好的樣品:SF7-1、SF7-2、SF7-3和SF7-4。結果顯示，在A549細胞中和COS7細胞中，它們的最高轉染效率分別達到48％、43％、52％、47％和56％、60％、52％、49％，與對照樣品PEI25kDa相比，它們在擁有較高轉染效率的同時具有較低的細胞毒性，在基因運送方面具有很好

3、的應用前景。
　　聚乙烯亞胺是目前最有效的陽離子非病毒基因載體之一，通常情況下，分子量較大的PEI的基因轉染效率相對較高，但與此同時它的細胞毒性也會隨之增大，在一定程度上限制PEI作為基因運送載體的應用。在本論文中我們將不同比例的N-(2-羥乙基)丙烯酰胺修飾到PEI1800上實現PEI羥基化，然后將羥基化的PEI1800與具有生物降解性的交聯劑N，N'-雙（丙烯酰）胱胺反應，實現兩者的交聯聚合，制備得到一系列羥基化的PEI聚合物