基于主客體作用的細胞內核酸鏈光控釋放的研究.pdf

1、基因治療在生物醫(yī)學和生物有機學領域有著廣闊的前景，基因沉默也有著重要的生物學意義?；蛑委燁I域的關鍵問題就是如何將外源核酸成功引入細胞以及在細胞內如何可控、高效的釋放。目前，利用納米材料作為負載體，運載外源核酸進入細胞已經獲得了很大的成功。本文主要研究了通過納米顆粒負載外源核酸進入細胞后，外源核酸鏈如何在細胞內可控、高效釋放的方法。
　　 本文首先研究了基于環(huán)糊精和偶氮苯的主客體相互作用實現(xiàn)體外光調控細胞基因沉默。將巰基化的環(huán)糊

2、精修飾在金納米顆粒表面，在目標核酸鏈上標記偶氮苯分子。在可見光照射下偶氮苯為反式構型，可以進入環(huán)糊精分子空腔，形成負載核酸鏈的金納米顆粒。利用金納米顆粒的生物相容性將核酸鏈負載進入細胞。通過紫外光的照射使偶氮苯的構型發(fā)生變化，脫離環(huán)糊精分子的空腔，實現(xiàn)目標鏈的可控釋放，達到抑制綠色熒光蛋白表達的目的。
　　 其次，分析研究了基于二茂鐵的協(xié)同競爭作用實現(xiàn)體外光調控目標核酸鏈在細胞中的快速釋放。二茂鐵分子與環(huán)糊精的結合常數(shù)比偶氮苯與

3、環(huán)糊精的結合常數(shù)高一個數(shù)量級，因此在有二茂鐵分子存在的條件下，二茂鐵與環(huán)糊精的強結合力促進偶氮苯分子從環(huán)糊精中的釋放。當光照與二茂鐵同時存在時，外源核酸會在進入細胞后快速的釋放，縮短光照時間。
　　 最后，研究了基于核酸三鏈結構的銀離子表面增強拉曼檢測。核酸單鏈能很好的穩(wěn)定金納米顆粒，核酸三鏈對金納米顆粒的穩(wěn)定性不強。銀離子能與兩個胞嘧啶作用形成配合物。溶液中沒有銀離子時，單鏈和雙鏈能很好的穩(wěn)定金納米顆粒。當加入銀離子后，單鏈通