水生動物烏龜和福壽螺細胞培養(yǎng).pdf

1、采用添加20％小牛血清的M199培養(yǎng)基，對烏龜(Chinemys reevsii Gray)心組織細胞進行了體外培養(yǎng)。結果顯示：遷出的細胞從形態(tài)上劃分主要有三種類型，分別為懸浮的血細胞、貼壁的上皮樣細胞和貼壁的成纖維樣細胞。接種后最先遷出的為血細胞，培養(yǎng)至第3 d，遷出上皮樣細胞和成纖維樣細胞，第14 d，形成了分別由上皮樣細胞和成纖維樣細胞構成的大片細胞群。研究結果表明培養(yǎng)過程中培養(yǎng)細胞在形態(tài)上可發(fā)生改變，同一組織可形成形態(tài)上完全不同

2、的培養(yǎng)細胞，同一細胞群也可形成形態(tài)完全不同的培養(yǎng)細胞。原代培養(yǎng)后期出現(xiàn)了大量細胞增殖活動及部分細胞喪失了接觸抑制現(xiàn)象，表明原代培養(yǎng)的心細胞已逐步實現(xiàn)轉化，形成了具有增殖能力的細胞群。 采用改良的M199培養(yǎng)基，對福壽螺(Ampullaria gigas Spix)足組織和外套膜組織細胞進行了體外培養(yǎng)。結果顯示：接種6 h后，細胞開始從組織塊中遷出，培養(yǎng)至第3 d，遷出細胞在組織塊周圍形成生長暈，第21～28 d，細胞覆蓋大部分培

3、養(yǎng)瓶底壁。足組織和外套膜組織細胞分別被傳至8代和9代。足組織和外套膜組織細胞在原代培養(yǎng)物中主要有兩類，一為上皮樣小細胞，形態(tài)為圓形、橢圓形或多邊形，直徑7～15μm；另一類為上皮樣中型和大型細胞，形態(tài)橢圓形或多邊形，直徑15～30 μm。上皮樣小細胞數(shù)量多，增殖速度較快，在原代和傳代培養(yǎng)的中后期皆可形成細胞單層。外套膜組織細胞的生長和增殖能力高于足組織細胞，其貼壁性也好于足組織細胞，Hoechst熒光染色顯示外套膜組織細胞的凋亡指數(shù)明顯