耐鹽短桿菌Y-1-4產(chǎn)脂肽類生物表面活性劑的研究.pdf

1、脂肽類生物表面活性劑是一類由微生物產(chǎn)生的次級代謝物，具有獨特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，表現(xiàn)出優(yōu)良的表面活性和生理特性，在石油工業(yè)、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、環(huán)境治理及化妝品等領(lǐng)域具有巨大的生態(tài)、社會和經(jīng)濟效益。因此，發(fā)掘產(chǎn)脂肽類生物表面活性劑微生物的資源，提高產(chǎn)量，具有廣泛的生物學(xué)和經(jīng)濟意義。
　　本論文的主要內(nèi)容包括耐鹽短桿菌（Brevibacterium halotolerans）Y-1-4所產(chǎn)脂肽理化性質(zhì)和抑菌活性的初步研究及其結(jié)構(gòu)分析，并對其發(fā)酵

2、條件進行了優(yōu)化。
　?。?）B.halotolerans Y-1-4的代謝產(chǎn)物為脂肽類生物表面活性劑，能將水的表面張力從72.29mN/m（25℃）降低到27 mN/m以下，CMC值為21.56mg/L，對石蠟、環(huán)己烷、棉籽油、玉米油都具有穩(wěn)定的乳化活性，對鹽濃度的耐受性為21％，在pH2~12范圍內(nèi)其表面張力變化不大，熱穩(wěn)定性好，沸水浴120min表面張力保持穩(wěn)定。
　?。?）B.halotolerans Y-1-4所產(chǎn)脂

3、肽分別對變形桿菌（P.vulgaris）、產(chǎn)氣腸桿菌（E.aerogenes）、大腸埃希氏桿菌（E.coli ATCC25922）有不同程度的抑制作用，對蠟樣芽孢桿菌（B.cereus）和金黃色葡萄球菌（S.aureus ATCC25923）的抑制效果尤其明顯；分別對梨葉點霉菌（P.pirina CFCC6862）、黃曲霉（A.flavus CGMCC3.2890）、褐色盤二孢（M.brunne CFCC86450）和黃曲霉（A.fla

4、vus CGMCC3.3950）的菌絲生長有不同程度的抑制效果。
　　（3）對B.halotolerans Y-1-4所產(chǎn)脂肽進行了分離和純化，采用經(jīng)酸沉淀、二氯甲烷抽提、薄層層析、硅膠柱層析和Sephadex LH-20凝膠層析等方法，經(jīng)氨基酸分析和LC-MS質(zhì)譜等進行結(jié)構(gòu)分析，發(fā)現(xiàn)該脂肽由五種Surfactin同系物組成，分別是C13 Surfactin、C14 Surfactin、C15 Surfactin、C16 Surf

5、actin和C17 Surfactin。這也是首次報道從耐鹽短桿菌（Brevibacterium halotolerans）發(fā)酵液中分離出莎梵婷（Surfactin）。
　?。?）用響應(yīng)面分析法優(yōu)化了B. halotolerans Y-1-4產(chǎn)脂肽的發(fā)酵培養(yǎng)基，以單因素實驗結(jié)果為依據(jù)進行Plackett-Burman設(shè)計，確定了NaCl濃度、接種量和初始pH值為影響脂肽產(chǎn)量的主要因素；設(shè)計最陡爬坡實驗確定最佳實驗中心點；通過Box