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1、本文以雜色蛤?yàn)檠芯繉?duì)象,主要從雜色蛤α-葡萄糖苷酶抑制肽的制備工藝優(yōu)化,酶解用酶固定化工藝研究,雜色蛤降血糖多肽的純化及微膠囊制備四個(gè)方面進(jìn)行研究,主要結(jié)果如下:
1、利用酶解法制備雜色蛤α-葡萄糖苷酶抑制肽,以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率為指標(biāo),采用單因素和正交實(shí)驗(yàn)對(duì)酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化,得到最佳工藝條件為:料液比(m/v)1:30,加酶量2.0%,酶解時(shí)間180min,酶解溫度32℃,pH2.0。在該條件下,胃蛋白酶對(duì)雜色蛤有
2、較好的酶解效果,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在上述最優(yōu)條件下,雜色蛤酶解液的蛋白水解度為17.4%;當(dāng)酶解產(chǎn)物濃度為50mg/mL時(shí),對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率為50.2%。
2、利用海藻酸鈉-殼聚糖對(duì)胃蛋白酶進(jìn)行固定化,以酶活回收率為指標(biāo),采用響應(yīng)面分析法進(jìn)行固定化工藝優(yōu)化,得到最佳工藝條件為:海藻酸鈉濃度為0.9%,游離酶稀釋倍數(shù)為10倍,氯化鈣濃度為3.6%,固定化時(shí)間為1.5h,在該條件下固定化酶的酶活回收率為73.42%。用固定
3、化胃蛋白酶酶解雜色蛤制備的多肽對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率為54.07%,結(jié)果表明:固定化胃蛋白酶的酶解效率略高于游離酶。
3、以多肽對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率為指標(biāo),采用DEAE-F.F及Sephadex G-25對(duì)雜色蛤降血糖多肽進(jìn)行分離純化,得到具有較高抑制活性的組分G,并測(cè)定該組分的分子量約為580Da。
4、利用海藻酸鈉-殼聚糖對(duì)雜色蛤降血糖多肽進(jìn)行包埋制備微膠囊,以包埋率為指標(biāo),采用正交實(shí)驗(yàn)分析得到最優(yōu)工藝為:
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