陸地棉重組自交系再生能力及相關(guān)基因的鑒定.pdf

1、棉花是主要的經(jīng)濟(jì)作物，在分子生物學(xué)快速發(fā)展的今天，傳統(tǒng)的育種方法存在較多的局限性，因此結(jié)合體細(xì)胞胚胎再生技術(shù)獲得優(yōu)良轉(zhuǎn)基因品種已是大勢所趨。到目前為止，只有少數(shù)的棉花品種具備快速高效獲得再生植株的特性，而大部分栽培推廣品種不具備這一特性。棉花體細(xì)胞胚再生過程中，影響胚性愈傷的分化和植株再生的因素有很多，其中供體的基因型、培養(yǎng)基的類型是體胚發(fā)生中影響較大的因素。通過正向遺傳學(xué)的策略定位控制棉花體胚發(fā)生能力的位點(diǎn)，將控制高再生能力的基因從再

2、生能力高的品種轉(zhuǎn)移到再生能力低的品種中去，從而提高優(yōu)良品種的再生能力，以獲得高再生能力的優(yōu)良棉花品種。
　　本研究主要是以可快速獲得再生植株的棉花品種(YZ-1)和長江流域主栽培品種(Emian22)為親本，通過雜交后和多年的自交，構(gòu)建的重組自交系群體，選取其中164個(gè)家系，采用IBA+KT(IK)和2，4-D+KT(DK)兩種不同激素組合的培養(yǎng)體系，分別對重組自交系群體YE的愈傷組織誘導(dǎo)率(CIF)、愈傷組織繼代繁殖力(CSC)

3、、愈傷組織的出胚率(CRE)以及愈傷組織出胚時(shí)間(CET)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以及對兩個(gè)體系下愈傷的顏色質(zhì)地，培養(yǎng)流程進(jìn)行對比分析。結(jié)果如下:
　　1.利用IK和DK體系對YE家系進(jìn)行再生能力篩選，結(jié)合愈傷繼代繁殖力、胚性愈傷分化時(shí)間、分化率等數(shù)據(jù)，以及愈傷組織的顏色質(zhì)地和不同體系下組織培養(yǎng)流程對比的綜合分析，結(jié)果表明IK培養(yǎng)體系比DK體系更適合YE家系的培養(yǎng)。
　　2.通過IK體系篩選得到36個(gè)可再生家系，DK體系篩選得到35個(gè)

4、可再生家系，共獲得46個(gè)可再生家系，兩個(gè)體系下都可再生的家系有25個(gè)，獲得31個(gè)可再生闊葉棉家系，得到16個(gè)再生能力接近YZ-1農(nóng)藝性狀較好的闊葉棉家系，并獲得再生植株。
　　3.基于本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的海陸種間高密度遺傳圖譜，以10cM遺傳距離挑選了494個(gè)覆蓋全基因組的標(biāo)記，對每個(gè)培養(yǎng)體系篩選出的5個(gè)高再生能力家系材料進(jìn)行全基因組背景檢測。通過對5個(gè)高再生能力材料的YZ-1等位基因的鑒定，將其具有YZ-1等位基因的位點(diǎn)作為可能控制再