重樓種質(zhì)篩選、多樣性初步分析及種子快繁研究.pdf

1、重樓種屬關(guān)系復(fù)雜，分類系統(tǒng)混亂，種間形態(tài)差異和遺傳變異較大，且不同種的重樓之間活性成分含量差異大，而重樓的種子繁育也一直未取得令人滿意的結(jié)果。本課題在對種植基地內(nèi)的重樓進(jìn)行分類鑒定（以《中國植物志》為準(zhǔn)）的基礎(chǔ)上，通過HPLC分析不同種重樓的活性成分含量（重樓皂苷Ⅶ、重樓皂苷Ⅵ、重樓皂苷Ⅱ、重樓皂苷Ⅰ、薯蕷皂苷、薯蕷皂苷元），運(yùn)用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)分析重樓的遺傳多樣性，采用摸索出的一種全新的種子快繁體系進(jìn)行重樓種苗的繁育，最終取得了以

2、下科研成果：
　　1.參考李恒的重樓分類系統(tǒng)，以《中國植物志》為準(zhǔn)，對種植于稀有中藥材繁育基地內(nèi)的重樓進(jìn)行分類鑒定，以確定栽培重樓的種屬關(guān)系。經(jīng)中南民族大學(xué)藥學(xué)院萬定榮教授和生命科學(xué)學(xué)院劉虹副教授鑒定為9個(gè)種，確定其中4種：七葉一枝花、華重樓、狹葉重樓和球藥隔重樓，另外5種為疑難種。
　　2.五種甾體皂苷的分布情況差別很大。重樓皂苷Ⅶ和Ⅰ在9種重樓中均有分布，重樓皂苷Ⅵ在其中6種重樓中有分布，而重樓皂苷Ⅱ和薯蕷皂苷分別只在其

3、中4種和3種重樓中有分布。因此，重樓皂苷Ⅶ和Ⅰ在9種重樓中分布最廣，其次為重樓皂苷Ⅵ。五種甾體皂苷的含量在9種重樓中存在極大差異。重樓皂苷Ⅶ和Ⅵ含量最高的是球藥隔重樓；重樓皂苷Ⅱ和Ⅰ含量最高的是七葉一枝花；薯蕷皂苷含量最高的是七葉一枝花和球藥隔重樓；5種甾體皂苷總含量的高低順序依次是：球藥隔重樓≈七葉一枝花﹥種3﹥?nèi)A重樓﹥種1﹥種9≈狹葉重樓≈種10﹥種2。
　　3.薯蕷皂苷元在9種重樓的根莖中均有分布，但含量差異極大。薯蕷皂苷元

4、含量的高低順序依次是：七葉一枝花>種2>華重樓≈種3>球藥隔重樓>種9>種1>狹葉重樓≈種10。9種重樓中甾體皂苷總含量和薯蕷皂苷元的含量之間具有較大的相關(guān)性。除種2外，甾體皂苷總含量較高的4種重樓（七葉一枝花、球藥隔重樓、種3和華重樓）均具有較高含量的薯蕷皂苷元，而其它4種甾體皂苷總含量較低的重樓（種1、種9、狹葉重樓和種10）則具有較低含量的薯蕷皂苷元。
　　4.從269條RAPD隨機(jī)引物中篩選出了22條擴(kuò)增穩(wěn)定且條帶清晰的引

5、物，對電泳譜圖上清晰穩(wěn)定的條帶進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，共檢測到87個(gè)清晰的擴(kuò)增位點(diǎn)，條帶大小在300bp~2600 bp之間，其中多態(tài)性位點(diǎn)79個(gè)，多態(tài)位點(diǎn)百分比達(dá)90.80％，表明9種重樓在物種水平上具有豐富的多態(tài)性。而UPGMA聚類分析的結(jié)果表明，9種重樓的相似度系數(shù)在0.4368~0.9310之間，表明重樓屬植物在種間存在較大的遺傳變異。9種重樓被聚為兩個(gè)大類，其中種1、種2、種3和種9為第一大類，種10、七葉一枝花、華重樓、狹葉重樓和球藥隔重