PD-1參與調(diào)節(jié)系統(tǒng)性紅斑狼瘡中B細(xì)胞功能的研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）是一種累及多系統(tǒng)多器官的自身免疫性疾病。SLE患者中T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞異常活化造成機(jī)體免疫功能亢進(jìn)，導(dǎo)致其外周存在高滴度的抗核抗體，形成抗原抗體復(fù)合物沉積，從而造成多器官和組織的損傷。SLE作為一種典型的自身免疫性疾病，對其發(fā)病機(jī)制的探究是尋找有效的免疫干預(yù)手段的重要前提。
　　由于T細(xì)胞和B細(xì)胞的異?；罨赟LE的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵的作用，T-

2、B細(xì)胞相互作用的分子機(jī)制的研究對于闡明 SLE的發(fā)病機(jī)制具有重要的意義。本研究首先采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測了系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周CD4+T和B細(xì)胞表面活化分子和協(xié)同刺激分子的表達(dá)，結(jié)果顯示SLE患者B細(xì)胞表面活化分子CD69的表達(dá)顯著高于正常人，并與抗dsDNA滴度呈正相關(guān)；同時患者CD4+T細(xì)胞表面活化分子CD69和HLA-DR的表達(dá)也均顯著高于正常人，并與抗dsDNA抗體水平呈正相關(guān)。表明SLE患者外周T細(xì)胞和B細(xì)胞均發(fā)生異常活化；

3、我們進(jìn)一步分別檢測SLE患者外周血CD4+T細(xì)胞和B細(xì)胞表面協(xié)同刺激分子對的表達(dá)，包括PD-1/PD-L1，ICOS/ICOSL,OX40/OX40L及CD40/CD40L的表達(dá)，結(jié)果顯示SLE患者CD4+T細(xì)胞表面PD-1的表達(dá)顯著高于正常人，并與抗核抗體、抗dsDNA抗體滴度呈現(xiàn)正相關(guān)； SLE患者B細(xì)胞表面PD-L1的表達(dá)顯著高于正常人，與抗dsDNA抗體呈現(xiàn)正相關(guān)；SLE患者B細(xì)胞表面ICOSL的表達(dá)顯著高于正常人，與抗dsDN

4、A抗體呈現(xiàn)正相關(guān)；SLE患者CD4+T細(xì)胞表面ICOS的表達(dá)顯著高于正常人，并與血清IgG水平正相關(guān)；SLE患者B細(xì)胞表面OX40L的表達(dá)顯著高于正常人，并與血清抗核抗體水平正相關(guān)；SLE患者CD4+T細(xì)胞表面OX40與CD40L及B細(xì)胞表面CD40的表達(dá)均顯著高于正常人，但與疾病嚴(yán)重程度（SLEDAI）無明顯相關(guān)性。
　　SLE患者T細(xì)胞表面PD-1和B細(xì)胞表面PD-L1的表達(dá)增高，并與患者外周血抗dsDNA抗體水平正相關(guān)，提示

5、PD-1/PD-L1可能參與B細(xì)胞的分化和功能調(diào)節(jié)。為此，本研究體外采用純化的PD-1蛋白刺激正常人 B細(xì)胞，研究 PD-1/PD-L1信號通路對B細(xì)胞功能的影響，結(jié)果顯示PD-1分子直接作用于B細(xì)胞后，B細(xì)胞表面IgG和PD-L1的表達(dá)水平顯著高于對照組；B細(xì)胞刺激上清中分泌的IgG抗體水平顯著高于未刺激對照組，但是 B細(xì)胞表面 CD38和CD138表達(dá)水平未有改變；同時刺激組B細(xì)胞內(nèi)Erk磷酸化水平顯著高于對照組，其他信號通路分子如

6、Pyk2、NF-?B磷酸化水平與對照組無明顯差異。
　　綜上所述，我們的研究結(jié)果表明： SLE患者的CD4+T細(xì)胞和B細(xì)胞處于相對活化的狀態(tài)；同時CD4+T細(xì)胞和B細(xì)胞表面的協(xié)同刺激分子對PD-1/PD-L1、ICOS/ICOSL、OX40/ OX40L及CD40/CD40L等的表達(dá)都有增高，提示T/B細(xì)胞通過這些分子對的相互作用而在疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要的作用；其中PD-1可以直接誘導(dǎo)B細(xì)胞表達(dá)PD-L1，并活化B細(xì)胞和促使