重要經(jīng)濟(jì)海洋生物西施舌群體遺傳學(xué)的研究.pdf

1、西施舌是我國沿海的一種名貴雙殼貝類,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,由于海域污染及濫捕等原因,導(dǎo)致資源量受到嚴(yán)重破壞。目前,西施舌人工育苗方面雖有較為系統(tǒng)的研究,但仍存在一些問題,幼貝成活率低成為制約人工養(yǎng)殖的主要因素。西施舌群體遺傳多樣性和遺傳分化的研究對于其種質(zhì)資源的保護(hù)和良種選育具有重要意義。本研究采用等位酶和AFLP技術(shù)對我國沿海西施舌群體進(jìn)行了遺傳多樣性和遺傳分化的研究,以期為我國西施舌種質(zhì)資源的可持續(xù)利用及保護(hù),加快良種選育提供科學(xué)依據(jù)

2、。
　　 1.采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳對江蘇啟東、福建漳港和廣西北海3個(gè)地區(qū)的西施舌野生群體進(jìn)行等位酶電泳檢測和酶譜分析。獲得7個(gè)酶12個(gè)位點(diǎn),其中8個(gè)位點(diǎn)為單態(tài)位點(diǎn),即Aat-1、Me-1、Est-2、Est-4、Acp-1、Acp-2、Amy-1、Amy-2;4個(gè)位點(diǎn)為多態(tài)位點(diǎn),即Sod-1、Mdh-1、Est-1、Est-3。雜合性分析結(jié)果顯示,多態(tài)位點(diǎn)中福建漳港群體的Sod-1和Est-1位點(diǎn)、廣西北海群體的Sod-

3、1位點(diǎn)符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05);江蘇啟東西施舌群體的多態(tài)位點(diǎn)中所有位點(diǎn),福建漳港西施舌群體的多態(tài)位點(diǎn)中Mdh-1、Est-3位點(diǎn),廣西北海西施舌群體的多態(tài)位點(diǎn)中Mdh-1、Est-1、Est-3位點(diǎn)均非常顯著偏離Hardy-Weinberg平衡(P＜0.01)。此外,所有多態(tài)位點(diǎn)中,除了江蘇啟東和福建漳港群體的Est-1位點(diǎn)表現(xiàn)出雜合子缺失(F＞0)外,各群體中每個(gè)位點(diǎn)均表現(xiàn)出雜合子過量(F＜0)。
　

4、　 2.等位酶分析西施舌群體遺傳多樣性和遺傳分化結(jié)果顯示:3個(gè)群體平均每位點(diǎn)等位基因數(shù)目(A)為1.7500;平均每位點(diǎn)有效等位基因數(shù)目(Ae)為1.3939;平均多態(tài)位點(diǎn)百分?jǐn)?shù)(P)為33.33％;觀察雜合度(H0)在0.2389到0.3083之間,平均值為0.2750;期望雜合度(He)在0.1496到0.2041之間,平均值為0.1765;群體間遺傳分化系數(shù)(GST)為0.0719;群體間的遺傳距離(D)在0.0164到0.03

5、02之間。結(jié)合雜合性分析結(jié)果,表明我國西施舌種質(zhì)資源狀況處于較好水平。
　　 3.利用擴(kuò)增片斷長度多態(tài)性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)標(biāo)記技術(shù)對我國沿海山東青島、江蘇啟東、福建漳港和廣西北海4個(gè)地區(qū)的野生西施舌群體和福建漳港地區(qū)的1個(gè)養(yǎng)殖群體進(jìn)行了遺傳多樣性和遺傳分化的研究。9對選擇性引物共擴(kuò)增618個(gè)位點(diǎn)。遺傳多樣性結(jié)果顯示,西施舌5個(gè)群體的平均每位點(diǎn)等位基因數(shù)(A)

6、介于1.3916-1.6036之間,平均為1.5000;平均每位點(diǎn)有效等位基因數(shù)(Ae)介于1.1733-1.2431之間,平均為1.2124;多態(tài)位點(diǎn)百分?jǐn)?shù)(P)介于39.16％-60.36％之間,平均為49.98％;Shannon氏指數(shù)(I)介于0.1684-0.2354之間,平均為0.2067;Nei's基因多樣性指數(shù)(H)介于0.1073-0.1506之間,平均為0.1320。其中,野生群體遺傳多樣性水平略高于養(yǎng)殖群體。群體間遺

7、傳分化結(jié)果顯示,群體間的遺傳分化系數(shù)(GST)介于0.0996-0.4835之間,平均為0.3318;群體間遺傳距離(D)介于0.0365-0.2937之間,平均為0.1858,說明西施舌群體間分化較大。通過對遺傳距離進(jìn)行聚類分析,山東青島和江蘇啟東的西施舌群體聚為一支,福建漳港和廣西北海的西施舌群體聚為一支,結(jié)合遺傳距離(D)及遺傳分化系數(shù)(GST),初步認(rèn)為兩支已分化達(dá)到亞種水平,并在3對引物組合(E-ACA/M-CGT、E-ACT

8、/M-CGT、E-AGA/M-CGT)的擴(kuò)增結(jié)果中找到15個(gè)可作為亞種鑒別的AFLP標(biāo)記。綜合兩項(xiàng)技術(shù)分析結(jié)果認(rèn)為,雖然我國西施舌資源受到嚴(yán)重破壞,但還未對其遺傳多樣性造成嚴(yán)重影響,應(yīng)及時(shí)采取有效的保護(hù)措施,以期為西施舌人工養(yǎng)殖保留可靠的種質(zhì)資源。
　　 5.以福建漳港野生西施舌為材料,采用FIASCO(Fast Isolation by AFLP SequencesCOntaining repeats)方法構(gòu)建西施舌(CA)n