黃顙魚(yú)與瓦氏黃顙魚(yú)雜交育種初步研究.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文黃顙魚(yú)與瓦氏黃顙魚(yú)雜交育種初步研究姓名：王衛(wèi)民申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：嚴(yán)安生20031101華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文和027mg／L。經(jīng)t檢驗(yàn)，結(jié)果是瓦氏黃顙魚(yú)窒息點(diǎn)與黃顙魚(yú)與雜種Fl窒息點(diǎn)存在著極顯著差異(P005)。7黃頹魚(yú)、瓦氏黃顙魚(yú)及其雜交Fl代LDH的C基因位點(diǎn)都只在肝組織表達(dá)。黃顙魚(yú)和瓦氏黃顙魚(yú)LDH和MDH兩種同工酶的酶譜差異不明顯，其雜交F1代基因表達(dá)為來(lái)自雙親基因的同步表達(dá)。黃

2、顙魚(yú)心肌組織的B4酶帶比瓦氏黃顙魚(yú)要深得多，說(shuō)明黃顙魚(yú)心肌組織的B。同工酶含量比瓦氏黃顙魚(yú)要高，這與黃顙魚(yú)耐低氧能力(窒息點(diǎn)O25m902／L)比瓦氏黃顙魚(yú)(窒息點(diǎn)O60m902／L)要強(qiáng)是相一致的。黃顛魚(yú)與瓦氏黃顙魚(yú)雜交F，代心肌組織的B。酶帶與黃顙魚(yú)一樣較深，其B4同工酶含量較高，雜交Fl代繼承了其母本黃顙魚(yú)的遺傳基因，與雜交F1代能夠在較低氧的環(huán)境(窒息點(diǎn)O27mgOJL)生活相一致。8通過(guò)條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得出適宜黃顙魚(yú)RAPD分析

3、的最佳反應(yīng)條件為：25“l(fā)的反應(yīng)體系中，含10PCR緩沖液25ul，模板DNA20ng，dNTPsO2mmol／L，Mgz25mmol／L，引物20ng，TaqDNA聚合酶125IU，01％TritonX一100。按照上面反應(yīng)條件，在下列熱循環(huán)參數(shù)：4min94。C預(yù)變性后，94oC變性lmin，38oC退火1min，72oC延伸2min，45個(gè)循環(huán)后，72”C延伸10min，RAPD擴(kuò)增產(chǎn)物帶譜清晰，特異性較好，具有較高的重復(fù)性和穩(wěn)定

4、性。9從80個(gè)引物中篩選出38個(gè)引物對(duì)黃顙魚(yú)與瓦氏黃顙魚(yú)及其雜種Fl代的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行了RAPD分析。結(jié)果表明，38個(gè)引物中33個(gè)引物的擴(kuò)增產(chǎn)物中出現(xiàn)了多態(tài)性DNA片段，占擴(kuò)增引物的868％，共出現(xiàn)206條特異性帶，多態(tài)率為493％。群體內(nèi)的多態(tài)率為黃顙魚(yú)O712，瓦氏黃顙魚(yú)O759，雜種F1代0781。群體內(nèi)的相似指數(shù)分別是瓦氏黃顙魚(yú)O885，黃顙魚(yú)0879，雜種F1代0864。黃顙魚(yú)與雜種Fl代的相對(duì)遺傳距離是00893，而瓦氏黃顙魚(yú)