光譜法和電化學(xué)方法結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)研究幾種藥物小分子與DNA的相互作用.pdf

1、本論文對(duì)近三十年來(lái)各種類型的小分子與DNA反應(yīng)機(jī)理的研究以及方法和手段進(jìn)行了較全面的綜述,將電化學(xué)分析法和光譜分析法與化學(xué)計(jì)量學(xué)方法相結(jié)合并應(yīng)用于幾種藥物與DNA作用研究,探討藥物與DNA的作用機(jī)理及在應(yīng)用方面的意義。本論文分為五個(gè)部分。
　　 第一部分:此部分綜述了DNA在生命活動(dòng)中的重要作用、DNA的結(jié)構(gòu)特性以及小分子與之作用方式等方面,并對(duì)小分子類型根據(jù)藥物、金屬絡(luò)合物、有機(jī)染料探針以及一些表面活性劑等類型分別展開(kāi)了評(píng)述,

2、另外就其研究的方法如紫外光譜,熒光,電化學(xué)方法,核磁共振方法和其他方法以及化學(xué)計(jì)量學(xué)方法在這方面的應(yīng)用也作了討論。最后展望了小分子與DNA反應(yīng)的發(fā)展和化學(xué)計(jì)量學(xué)在其中的應(yīng)用趨勢(shì)。
　　 第二部分:本工作應(yīng)用循環(huán)伏安法,微分脈沖伏安法,紫外光譜法,熒光光譜法結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)研究了萊克多巴胺(一種瘦肉精)在pH為中性的Tris-HCl緩沖溶液中與DNA的相互作用。從微分脈沖伏安實(shí)驗(yàn)中我們得出萊克多巴胺與DNA的作用模式為嵌插方式,循環(huán)

3、伏安實(shí)驗(yàn)表明萊克多巴胺與DNA的作用機(jī)理是伴隨有兩個(gè)質(zhì)子的失去和兩個(gè)電子轉(zhuǎn)移的不可逆氧化機(jī)理。實(shí)驗(yàn)中并得到了兩者的作用參數(shù)。通過(guò)紫外和熒光實(shí)驗(yàn)并且結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)多元曲線分辨-交替最小二乘法(MCR-ALs)得到了萊克多巴胺,DNA和萊克多巴胺-DNA的純光譜和濃度趨勢(shì),濃度趨勢(shì)可以定量反應(yīng)過(guò)程。
　　 第三部分:應(yīng)用微分脈沖伏安法,循環(huán)伏安法和熒光分析法研究了沙丁胺醇(一種動(dòng)物生長(zhǎng)促進(jìn)劑)與DNA的作用。從循環(huán)伏安圖上得出沙丁胺

4、醇表現(xiàn)的是不可逆的氧化機(jī)理,是一個(gè)電子轉(zhuǎn)移的電化學(xué)反應(yīng)過(guò)程。小牛胸腺DNA的存在使沙丁胺醇的峰電流下降,峰電位正移,從而得出兩者的相互作用方式為嵌插作用。通過(guò)對(duì)電化學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元曲線分辨-交替最小二乘法(MCR-ALS)解析得到結(jié)合常數(shù)和結(jié)合比分別為(2.0±0.5)×105M-1和1:1。在含有1.00×10-6 mol L-1的雙鏈DNA溶液中,得到的沙丁胺醇的線性范圍為3.02×10-6到1.23×10-4 mol L-1,檢測(cè)限

5、為5.11×10-7 mol L-1。該方法同樣適合于尿樣和血清樣中的沙丁胺醇的測(cè)定,測(cè)定值和估計(jì)值之間無(wú)顯著性差異。這種方法對(duì)測(cè)定微量沙丁胺醇的靈敏度比較高。
　　 第四部分:在模擬人體生理?xiàng)l件下,以溴化乙錠探針利用紫外可見(jiàn)光度法,粘度法和熒光光譜法研究了中藥提取物羥基喜樹(shù)堿與DNA的作用機(jī)理,實(shí)驗(yàn)結(jié)論為羥基喜樹(shù)堿與DNA的作用方式為嵌插作用。通過(guò)化學(xué)計(jì)量學(xué)方法多元曲線分辨-交替最小二乘法(MCR-ALS)得到羥基喜樹(shù)堿與DN

6、A的作用常數(shù)和結(jié)合數(shù)為(7.1±0.5)×104 M-1和1.1。粘度實(shí)驗(yàn)得到羥基喜樹(shù)堿會(huì)使DNA的粘度增大,證明兩者作用方式為嵌插,同時(shí)化學(xué)汁量學(xué)方法平行因子法(PARAFAC)用來(lái)解析溴化乙錠探針,羥基喜樹(shù)堿與DNA相互作用的三維熒光數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)證明羥基喜樹(shù)堿-DNA與溴化乙錠探針是協(xié)同作用,形成一種三元絡(luò)合物的物質(zhì)。
　　 第五部分:以電化學(xué)分析法,熒光光譜法和鹽效應(yīng)實(shí)驗(yàn)對(duì)比研究了三種激素類藥物(多巴胺,左旋多巴,多巴酚丁胺