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1、目的:研究成年運(yùn)動(dòng)小鼠主要器官中的自噬水平的改變,探討自噬與運(yùn)動(dòng)的關(guān)系,為今后進(jìn)一步研究自噬在運(yùn)動(dòng)延緩衰老的過(guò)程中的意義奠定基礎(chǔ)。
方法:以自主運(yùn)動(dòng)的方式建立實(shí)驗(yàn)組模型,采用體重與飲食改變?cè)u(píng)價(jià)兩組小鼠的生理指標(biāo)的變化;采用大小鼠抓力測(cè)定儀、小鼠轉(zhuǎn)輪式疲勞儀評(píng)價(jià)兩組小鼠肌力的改變;采用HE染色法比較兩組小鼠股直肌肌纖維的改變;采用SOD、MDA測(cè)定試劑盒測(cè)試兩組小鼠骨骼肌中SOD、MDA水平的變化;稱(chēng)重比較兩組小鼠的腹腔內(nèi)脂
2、肪含量,通過(guò)這一系列的實(shí)驗(yàn)證明成年運(yùn)動(dòng)小鼠模型建立的有效性和可靠性。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步采用Western blot技術(shù)檢測(cè)兩組小鼠的骨骼肌、心肌和肝臟的自噬相關(guān)蛋白p62和LC3的表達(dá),并作定量分析。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組小鼠的體重與對(duì)照組相比,沒(méi)有明顯改變,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但飲食改變明顯,實(shí)驗(yàn)組小鼠的平均飲食量明顯高于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);肌力測(cè)試顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠的抓力和跑步的距離大于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0
3、5);HE染色顯示在相同放大倍數(shù)下實(shí)驗(yàn)組小鼠的股直肌肌纖維的橫截面面積大于對(duì)照組,兩組差別明顯;SOD、MDA測(cè)定結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠的抗氧化酶的活性高于對(duì)照組小鼠,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);腹腔內(nèi)脂肪含量測(cè)定結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠的腹腔內(nèi)脂肪含量低于對(duì)照組,兩組數(shù)據(jù)對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Western blot檢測(cè)小鼠骨骼肌、心肌、肝臟的自噬特異性蛋白LC3表達(dá)水平發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值較對(duì)照組高,而自噬底物p6
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