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1、目的:運(yùn)用熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)揭示刮痧對(duì)局部皮膚組織形態(tài)學(xué)和相關(guān)化學(xué)成分變化的影響。
方法:以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,依據(jù)觀(guān)測(cè)時(shí)間的不同隨機(jī)分為正常組、刮痧后即刻、1天、3天、5天共5組,先剔除背毛暴露出脊柱兩側(cè)皮膚,對(duì)刮痧后即刻、1天、3天、5天這4組大鼠用刮痧板沿一側(cè)相當(dāng)于人體膀胱經(jīng)走行的部位由上向下刮拭出痧。取材時(shí)將大鼠灌流固定,并取下出痧部位的皮膚組織。同時(shí)取下正常大鼠的相應(yīng)部位用于對(duì)照。取下的組織放在25%高滲糖中脫水后用冰
2、凍切片機(jī)制成20微米的系列組織片,然后分別用于神經(jīng)元型一氧化氮合酶(nNOS)、5-羥色胺(5-HT)、組胺(HA)、鬼筆環(huán)肽(phalliodin)、P物質(zhì)(SP)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)等抗體進(jìn)行熒光免疫組織化學(xué)染色和HE染色。
結(jié)果:
1.刮后即刻大鼠背部刮痧區(qū)局部皮膚與正常組比較,外觀(guān)和毛囊、血管等組織形態(tài)均有顯著差異;1天,3天差異逐漸減少,直到5天與正常組無(wú)明顯差異;刮后即刻、1天、3天、5天大鼠背
3、部刮痧區(qū)局部皮膚與正常組比較,CGRP與SP表達(dá)并無(wú)顯著差異。
2.刮后即刻大鼠背部刮痧區(qū)局部皮膚與正常組比較,nNOS、5-HA、HA陽(yáng)性表達(dá)明顯增強(qiáng),標(biāo)記數(shù)量增多,與正常組織相比具有顯著的形態(tài)學(xué)差異;刮痧后1天、3天、5天組大鼠的組織中陽(yáng)性表達(dá)逐漸減弱,5天組與正常組織相比并無(wú)顯著差異。
結(jié)論:
1.刮痧對(duì)局部皮膚內(nèi)的神經(jīng)纖維形態(tài)無(wú)明顯改變,并且刮痧后的毛囊、血管等組織形態(tài)學(xué)改變也將在5天內(nèi)基本恢復(fù)至正
4、常水平,一定程度上證明了刮痧療法的安全性。
2.刮痧對(duì)局部組織中nNOS、5-HA、HA的表達(dá)起到上調(diào)作用,提示刮痧的作用機(jī)制可能與這些化學(xué)成分所產(chǎn)生的的生物學(xué)效應(yīng)有關(guān),同時(shí)其表達(dá)變化在遠(yuǎn)期(第5天)逐漸恢復(fù)正常,說(shuō)明刮痧的作用具有一定的持續(xù)性。
3.本研究探索性采用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀(guān)察刮痧前后局部皮膚組織中相關(guān)活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化來(lái)探討刮痧所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng),結(jié)果提示熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)可能成為揭示刮痧生物學(xué)效應(yīng)的有
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