少腹逐瘀湯對(duì)寒凝血瘀型內(nèi)異癥患者內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌ICAM-1、MMP-2、VEGF的影響.pdf

1、目的：研究證實(shí)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病與子宮內(nèi)膜發(fā)生“黏附-侵襲-血管生成”這三個(gè)病理過(guò)程密不可分。阻斷三者之一，可以控制子宮內(nèi)膜異位癥的病情進(jìn)展。而ICAM-1、MMP-2、VEGF分別是這三個(gè)過(guò)程中的關(guān)鍵因子。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用細(xì)胞分子生物學(xué)的方法，分別分離培養(yǎng)出對(duì)照組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞，子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)這三組細(xì)胞中ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況。再運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PC

2、R檢測(cè)不同濃度少腹逐瘀湯對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者異位、在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌ICAM-1、MMP-2、VEGF的影響。探討少腹逐瘀湯防治子宮內(nèi)膜異位癥的可能原因，臨床上為應(yīng)用少腹逐瘀湯治療子宮內(nèi)膜異位癥的可能性提供理論依據(jù)。
　　方法：1.取10例寒凝血瘀型子宮內(nèi)膜異位癥患者的異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜為研究組，取10例單純子宮平滑肌瘤患者的子宮內(nèi)膜為對(duì)照組，培養(yǎng)出各組的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞。2.運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)出各組第4代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)

3、胞中ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況。3.在第4代在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜組間質(zhì)細(xì)胞中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的少腹逐瘀湯。運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR測(cè)定加藥后在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞及培養(yǎng)基中 ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)情況，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果各組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞實(shí)時(shí)熒光定量PCR的檢測(cè)結(jié)果：I

4、CAM-1：異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞ICAM-1mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組，而在位內(nèi)膜組又明顯高于對(duì)照組；MMP-2：異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞MMP-2 mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組，而在位內(nèi)膜組又明顯高于對(duì)照組；VEGF：異位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)明顯高于在位內(nèi)膜組，而在位內(nèi)膜組又明顯高于對(duì)照組；差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。加少腹逐瘀湯后，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的檢測(cè)結(jié)果：在位內(nèi)膜組：加藥后，細(xì)胞及

5、培養(yǎng)基中ICAM-1、MMP-2、VEGF mRNA的表達(dá)均較未加藥組下降。異位內(nèi)膜組：加藥后，細(xì)胞及培養(yǎng)基中ICAM-1、MMP-2、VEGFmRNA的表達(dá)也較未加藥組下降。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。且這種下降的趨勢(shì)與加藥濃度密切相關(guān)。在位內(nèi)膜組：當(dāng)濃度增加至5g/L時(shí)，ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)下降至低谷，隨著濃度增加，ICAM-1、MMP-2、VEGF的mRNA表達(dá)呈上升趨勢(shì)，但上升幅度不大，且始終

6、低于未加藥。異位內(nèi)膜組：當(dāng)濃度增加至5g/L時(shí)，ICAM-1、MMP-2、VEGFmRNA的表達(dá)均下降至低谷。隨著濃度增加，3個(gè)因子的表達(dá)上升，但幅度平緩，仍低于未加藥組。結(jié)論1.作為“黏附-侵襲-血管生成”這三個(gè)步驟中的重要因子，ICAM-1、MMP-2、VEGF的分泌在對(duì)照組、異位內(nèi)膜組、在位內(nèi)膜組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中差異顯著，說(shuō)明這3個(gè)因子與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可以作為判定少腹逐瘀湯防治子宮內(nèi)膜異位癥的有效指標(biāo)。2.少