鯽感染鯉皰疹病毒Ⅱ的組織病理學(xué)研究.pdf

1、鯽（Carassius auratus）是我國最重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類，其變異品種繁多，包括具有觀賞價(jià)值的金魚和其他變種鯽。近年來，國內(nèi)鯽養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)不斷遭到疾病的威脅，其中由鯉皰疹病毒Ⅱ(CyHV-2)引起的疾病最具代表性。CyHV-2是皰疹病毒性造血器官壞死癥的病原，僅感染金魚(Carassius auratus)、鯽(Carassius auratus)及其變種，當(dāng)水溫在15～25℃時(shí)，可造成近100％的死亡率。目前，CyHV-2的已有研

2、究成果主要有病毒的形態(tài)及分類地位、流行特點(diǎn)、分子診斷技術(shù)和CyHV-2部分分離株全基因序列，但CyHV-2介導(dǎo)的組織損傷不系統(tǒng)，其致病機(jī)理尚未明晰。為了全面了解CyHV-2對金魚、鯽的組織損傷，本研究通過CyHV-2人工感染并結(jié)合自然感染CyHV-2的材料，系統(tǒng)研究CyHV-2在魚體各組織的增殖過程及其介導(dǎo)的組織病理損傷，主要研究結(jié)果如下:
　　(1)本研究選取CyHV-2分離株SY-C1編碼的胸腺激酶(TK)基因作為病毒全基因組

3、的等價(jià)物，建立了CyHV-2的熒光定量PCR法，其準(zhǔn)確定量的范圍為102～1011。
　　(2)以異育銀鯽為對象，構(gòu)建CyHV-2的急性和慢性感染模型，結(jié)合自然感染材料，分析CyHV-2的增殖過程。急性感染模式下，病毒感染3天后，感染魚開始死亡，脾腎組織的病毒含量迅速上升到108拷貝數(shù)/μg DNA以上，并持續(xù)上升直至死亡率降低。慢性感染模式下，脾腎組織的病毒拷貝數(shù)多在106拷貝數(shù)/ug DNA以下，實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)無死亡率發(fā)生。自然感

4、染與人工慢性感染的病毒載量接近，表明兩者的感染程度相似。比較人工感染和自然感染的魚體各組織的病毒載量的變化規(guī)律，說明鰓和中腎均為病毒的易感組織，推測病毒主要通過血道在魚體內(nèi)散播。
　　(3)系統(tǒng)分析了不同感染模式下魚體鰓、脾、中腎、肝、腸和腦組織的病理變化過程。急性感染條件下，鰓、脾、中腎和腦組織的病理損傷嚴(yán)重，主要以壞死病變?yōu)橹?，其中脾臟的廣泛性點(diǎn)狀壞死灶為最典型的特征。人工慢性感染和自然感染條件下，魚體初級鰓小片增生，次級鰓小

5、片卷曲和上皮脫落;脾臟內(nèi)實(shí)質(zhì)組織的凝固性壞死，網(wǎng)狀造血細(xì)胞由弱堿性轉(zhuǎn)變?yōu)槭人嵝?，致使網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)強(qiáng)烈的嗜酸性;中腎組織內(nèi)形成新生核的腎小管上皮細(xì)胞比例上升，炎癥、組織內(nèi)出血、肉芽組織、實(shí)質(zhì)組織凝固性壞死和腎小管上皮細(xì)胞顆粒樣變性;肝細(xì)胞色素代謝障礙，脂褐素累積;腸道小腸絨毛上的杯狀細(xì)胞數(shù)量和分泌活性變化;局部神經(jīng)細(xì)胞壞死、膠質(zhì)細(xì)胞和浦肯野氏細(xì)胞壞死以及神經(jīng)纖維斷裂。組織病理分析結(jié)合病毒增殖過程，慢性感染模式是自然感的重復(fù)，且慢性感染和自