Ras和Sos1蛋白在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)意義.pdf

1、背景及目的：Bonfini等人在果蠅眼發(fā)育的研究中發(fā)現(xiàn)了Sos蛋白，認(rèn)為其能夠在不同的細(xì)胞過(guò)程中發(fā)揮作用，其種系突變誘導(dǎo)了各種進(jìn)展性疾病和功能紊亂。Ras是來(lái)自G蛋白家族的小單體蛋白質(zhì)，可與GTP結(jié)合。具有活性的Ras蛋白對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化具有重要的作用，Ras信號(hào)通路參與惡性轉(zhuǎn)化的異常調(diào)節(jié)。Ras的活化型可激活RAF1/促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)信號(hào)通路，這對(duì)于細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)化、存活和遷移具有決定性作用

2、。本實(shí)驗(yàn)研究 Ras及Sos1蛋白在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)，分析這些表達(dá)與上皮性卵巢癌手術(shù)-病理分期、病理分級(jí)、手術(shù)滿意度（殘留病灶直徑是否小于1cm）、患者無(wú)瘤生存時(shí)間等相關(guān)性，對(duì)進(jìn)一步探討Ras/Sos1蛋白及其信號(hào)通路在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用奠定理論基礎(chǔ)，為卵巢癌診斷和預(yù)后評(píng)估提供參考。
　　方法：（1）搜集標(biāo)本及相關(guān)資料，包括手術(shù)切除上皮性卵巢癌標(biāo)本和手術(shù)切除交界性上皮性卵巢腫瘤、卵巢上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織對(duì)照標(biāo)本；

3、同時(shí)搜集患者的年齡、初診日期、手術(shù)-病理分期與病理分級(jí)、手術(shù)滿意度等臨床相關(guān)資料及隨訪情況等。（2）免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)，分別以Ras/ Sos1蛋白為一抗，采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連接法在上皮性卵巢癌與其它卵巢組織中進(jìn)行免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，在顯微鏡下定性觀察兩種蛋白在細(xì)胞膜與細(xì)胞漿的表達(dá)強(qiáng)度，記錄包括陰性、弱陽(yáng)性（+）,陽(yáng)性（++）和強(qiáng)陽(yáng)性（+++），計(jì)算其陽(yáng)性率；光密度測(cè)定，將所有上皮性卵巢癌病例免疫組化標(biāo)本

4、，進(jìn)行攝片，以圖像分析軟件ipwin32，進(jìn)行光密度測(cè)定。（4）統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用x2檢驗(yàn)對(duì)兩種蛋白在上皮性卵巢癌及它卵巢組織中表達(dá)的陽(yáng)性率進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)；采用SPSS19.0軟件，將Sos1/Ras蛋白在卵巢癌中表達(dá)的光密度值，按年齡、病理類型、手術(shù)-病理分期、病理分級(jí)、手術(shù)滿意度（殘留病灶直徑是否小于1cm）進(jìn)行相關(guān)性（r）分析；同時(shí)分析兩種蛋白不同表達(dá)強(qiáng)度的晚期患者（Ⅲ-Ⅳ期）之間無(wú)瘤生存時(shí)間的差異。設(shè)檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05，P＜0.0

5、5為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：共觀察上皮性卵巢癌病例62例，平均年齡50.47±9.77；手術(shù)-病理分期Ⅰ期患者6例，Ⅱ期5例，Ⅲ期54例，Ⅳ期4例；病理分級(jí)低分化、中等分化、高分化分別為36例、11例和10例；行滿意的腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)（術(shù)后殘余病灶直徑小于1cm）36例和非滿意的腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)（術(shù)后肉眼所見(jiàn)殘留病灶大于或等于1cm）26例；無(wú)瘤生存時(shí)間最長(zhǎng)141月，最短2月。另搜集交界性上皮性卵巢腫瘤標(biāo)本5份，卵巢上皮性囊腺瘤

6、15份、正常卵巢組織標(biāo)本18份。
　　Sos1蛋白在上皮性卵巢癌、交界性腫瘤、上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為82.26%、60.00%、66.67%、33.33%，上皮性卵巢癌與正常卵巢組織的陽(yáng)性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=14.00＞7.88，p＜0.005)，其余陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2＜3.84，P＞0.05)。上皮性卵巢癌表達(dá)的陽(yáng)性者中，均出現(xiàn)了弱陽(yáng)性（54.71%）、中度陽(yáng)性（23.53%）和強(qiáng)陽(yáng)性（

7、11.76%），其他幾種類型的卵巢組織僅有弱陽(yáng)性（66.67%-80.00%）和中度陽(yáng)性（20.00%-33.33%）表達(dá)。
　　Ras蛋白在上皮性卵巢癌、交界性腫瘤、上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為90.32%、80.00%、53.33%、44.44%。上皮性卵巢癌與上皮性囊腺瘤和正常卵巢組織的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.32、15.60＞7.88，p＜0.005)，其余陽(yáng)性率之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2＜3.8

8、4，P＞0.05)。上皮性卵巢癌均出現(xiàn)了弱陽(yáng)性（53.57%）、中度陽(yáng)性(33.93%)和強(qiáng)陽(yáng)性(12.50%)，其他卵巢組織僅有弱（陽(yáng)性50.00%-81.50%）和中度陽(yáng)性（12.50%-50.00%）反應(yīng)。
　　Ras和Sos1蛋白在上皮性卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)的陽(yáng)性率均以細(xì)胞膜和細(xì)胞漿同時(shí)存在（82.26%和71.19%）為主，僅表達(dá)于細(xì)胞膜（6.84%和3.23%）或細(xì)胞漿（6.45%和1.61%）的陽(yáng)性率很低（p＜0.005

9、）。
　　Sos1蛋白在各種病例分組中表達(dá)的光密度均無(wú)相關(guān)性（r=-0.10-0.99，P＞0.05）。Ras蛋白在不同病理類型病例表達(dá)的光密度具有相關(guān)性，漿液性囊腺癌中的表達(dá)較其他上皮性卵巢癌病理類型更為顯著（r=0.26,p=0.04）；Ⅲ-Ⅳ期低分化腺癌及漿液性囊腺癌患者無(wú)瘤生存時(shí)間的長(zhǎng)短與Ras蛋白表達(dá)的光密度存在相關(guān)性（p=0.04），其他病例分組Ras表達(dá)的光密度均無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。
　　結(jié)論：研究結(jié)果顯

10、示，Sos1、Ras蛋白在上皮性卵巢癌中表達(dá)的陽(yáng)性率高于正常卵巢和良性卵巢腫瘤組織，且大部分以細(xì)胞漿和細(xì)胞膜同時(shí)表達(dá)為主，表明這兩種蛋白與上皮性卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展可能存在內(nèi)在聯(lián)系。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，Ras蛋白在漿液性上皮性卵巢癌的表達(dá)比在其他病理類型的表達(dá)更為顯著，提示它的表達(dá)存在組織類型的差異，這個(gè)特點(diǎn)可用來(lái)支持卵巢漿液性腺癌的特異性診斷；同時(shí)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析也提示兩種蛋白的表達(dá)程度與上皮性卵巢癌患者年齡、手術(shù)病理分期、病理分級(jí)、手術(shù)滿意度這