蛋白與氟洛芬反應(yīng)機(jī)理及洛美沙星在熒光分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、熒光分析法以其經(jīng)濟(jì)、簡便,靈敏度高、選擇性好、檢測限低等眾多優(yōu)勢而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等眾多領(lǐng)域。本文采用熒光光譜法研究了蛋白與藥物之間相互作用的機(jī)理,以及洛美沙星在熒光分析研究中的應(yīng)用。本研究內(nèi)容共包含下五部分:
　　第一章:綜合介紹了藥物分析在藥學(xué)和生命科學(xué)研究領(lǐng)域的重要地位以及發(fā)展過程。據(jù)此,對各種熒光分析方法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述,為篩選及研發(fā)藥效高、毒副作用小、應(yīng)用廣的新藥提供了豐富的理論依據(jù)。共引

2、用參考文獻(xiàn)59篇。
　　第二章:利用熒光猝滅法以及同步熒光法研究了不同溫度下獸用藥氟洛芬與牛血清白蛋白之間的相互作用,以及幾種常見金屬離子(Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe3+、Co2+、Ni2+)對此體系的影響。研究結(jié)果表明,氟洛芬使牛血清白蛋白的熒光發(fā)生猝滅,此過程為靜態(tài)猝滅,并伴有非輻射能量轉(zhuǎn)移的發(fā)生;二者主要通過靜電引力結(jié)合,其結(jié)合常數(shù)為103數(shù)量級(jí),結(jié)合位點(diǎn)數(shù)約為1,結(jié)合距離約為2.20 nm;Hill系數(shù)nH略大于1

3、,表現(xiàn)為非常弱的正協(xié)同作用。同步熒光光譜表明氟洛芬使牛血清白蛋白構(gòu)象發(fā)生了變化。
　　第三章:為解決經(jīng)典熒光光譜法在研究藥物與蛋白結(jié)合機(jī)理中可能存在的缺陷,以牛血清白蛋白與獸用藥氟洛芬的結(jié)合為例,在生理?xiàng)l件(含0.15 mol/L NaCl,pH7.40的Tris-HCl緩沖溶液)下,利用以氟洛芬為熒光檢測對象、牛血清白蛋白為猝滅劑的改進(jìn)熒光研究方法研究了藥物與蛋白的結(jié)合機(jī)理,并與經(jīng)典熒光光譜法進(jìn)行比較,同時(shí)運(yùn)用紫外吸收光譜法對該

4、方法進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明改進(jìn)熒光光譜法能更準(zhǔn)確和全面地表征蛋白與藥物之間的相互作用。
　　第四章:在pH6.0的HAc-NaAc緩沖溶液中,洛美沙星能夠與Tb3+結(jié)合發(fā)生共振能量轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生稀土敏化熒光。其最佳激發(fā)、發(fā)射波長分別為λex=320 nm、λem=545 nm。在該體系中加入諾氟沙星,可使其熒光進(jìn)一步增強(qiáng)。據(jù)此建立了測定NFLX含量的新方法,并將該方法用于諾氟沙星膠囊及尿樣中諾氟沙星含量的測定。
　　第五章:利用