過度訓(xùn)練及丹參注射液對(duì)大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響研究.pdf

1、研究目的:細(xì)胞凋亡普遍存在于生物體的心臟發(fā)育過程、機(jī)體運(yùn)動(dòng)過程、疾病發(fā)生發(fā)展的過程等各項(xiàng)生理病理過程中,但是目前還尚未完全掌握細(xì)胞凋亡的機(jī)制。通過本次實(shí)驗(yàn),試圖通過力竭運(yùn)動(dòng)的模型,探求SD大鼠心肌細(xì)胞凋亡的特征和凋亡發(fā)生發(fā)展變化的規(guī)律,爭取得到與運(yùn)動(dòng)負(fù)荷與細(xì)胞凋亡存在關(guān)聯(lián)的證據(jù),此外也可以進(jìn)一步探討運(yùn)動(dòng)引起心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制,為以后不斷開展運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的監(jiān)控研究,奠定一定的理論依據(jù)。
　　 研究方法:10周齡健康雄性Sprague-

2、Dawley大鼠110只隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(n=10)、力竭運(yùn)動(dòng)組(n=50)和力竭運(yùn)動(dòng)并灌服丹參注射液組(n=50),其中力竭組和力竭運(yùn)動(dòng)并灌服丹參注射液組隨機(jī)分成5小組(每組10只):即刻、運(yùn)動(dòng)后6h、24h、48h和72h,使之運(yùn)動(dòng)3周,每一次運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度均從5m/min開始,10min內(nèi)逐漸遞增速度至30m/min,坡度為0°,維持這個(gè)運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度,直到大鼠力竭。三組大鼠分別于安靜狀態(tài)和運(yùn)動(dòng)后即刻、運(yùn)動(dòng)后6h、24h、48h和72h處死

3、,將心臟部分組織制做成組織勻漿,取大鼠的心肌組織制備石蠟切片,然后進(jìn)行TUNEL標(biāo)記,在熒光顯微鏡40×10倍下觀察凋亡心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)在安靜對(duì)照組中,偶見有散在的心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡,在反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)組中,可以檢測到明顯的凋亡細(xì)胞核,其心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)比安靜組顯著升高,并且凋亡指數(shù)差異具有顯著意義(p<0.05)。
　　 (2)顯微鏡下能夠觀察到心肌凋亡細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了不規(guī)則改變,細(xì)胞核內(nèi)染色

4、質(zhì)凝聚到核膜下周邊,線粒體內(nèi)外膜的完整性被破壞,變?yōu)榭张轄?細(xì)胞膜和細(xì)胞核膜結(jié)構(gòu)被破壞等。在相同時(shí)間點(diǎn)上,丹參灌服組和非灌服組在反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)后心肌細(xì)胞凋亡間具有顯著性差異,但兩者動(dòng)態(tài)變化有一定的相似性。
　　 (3)在力竭運(yùn)動(dòng)組中,大鼠心肌組織SOD活性和安靜對(duì)照組相比下降很多,其差異具有顯著意義(p<0.05),丹參灌服組SOD活性下降較力竭組緩和。
　　 (4)在力竭運(yùn)動(dòng)后,反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠心肌組織中線粒體鈣含量比