對(duì)三株益生菌的生物拮抗性和發(fā)酵工藝條件的研究.pdf

1、微生態(tài)制劑越來(lái)越受到人們的關(guān)心和重視，相對(duì)于單一種類的微生態(tài)制劑，復(fù)合型微生態(tài)制劑以其更好的療效和作用更加受到關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)就是要研究一種三聯(lián)益生菌制劑來(lái)替代傳統(tǒng)的抗生素藥物治療腹瀉。傳統(tǒng)治療腹瀉的方法有很多弊端，如四環(huán)素，氟哌酸對(duì)嬰幼兒骨骼發(fā)育有影響;氯霉素口服可導(dǎo)致再生障礙性貧血等。微生態(tài)學(xué)研究證明:人體正常菌群，對(duì)人類腸道不但具有生物屏障作用，而且對(duì)腸道致病菌有較好的抑制作用。為了尋找一種有效的腸道菌群調(diào)整劑，我們選用人體正常菌群之

2、一的嗜酸乳桿菌為主要菌種，制成復(fù)方嗜酸乳桿菌制劑以滿足臨床需要。
　　 目的:
　　 1、通過(guò)對(duì)已有菌種的鑒定和檢驗(yàn)，確定三株益生菌對(duì)腸道致病菌（大腸埃希菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、金黃色葡萄球菌）有抑制作用。2、通過(guò)拮抗實(shí)驗(yàn)證明三聯(lián)益生菌制劑對(duì)致病菌的拮抗作用。3通過(guò)對(duì)發(fā)酵條件的摸索，為將來(lái)的中試和生產(chǎn)提供依據(jù)。
　　 方法:
　　 1通過(guò)形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)等方法對(duì)各個(gè)菌種進(jìn)行鑒定。
　　 2耐藥性評(píng)

3、價(jià)實(shí)驗(yàn):采用藥敏紙片瓊脂擴(kuò)散法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)菌株對(duì)十種抗生素的敏感程度。
　　 3菌種的生長(zhǎng)曲線測(cè)定:對(duì)三種益生菌和四種腸道致病菌采取連續(xù)培養(yǎng)，每隔一定時(shí)間取樣涂平板，記取活菌數(shù)的方式來(lái)測(cè)定其生長(zhǎng)曲線。
　　 4拮抗實(shí)驗(yàn):單聯(lián)拮抗實(shí)驗(yàn)，將三種益生菌和四種腸道致病菌進(jìn)行兩兩配對(duì)，混合后同時(shí)培養(yǎng)，間隔一定時(shí)間取樣涂平板，記取活菌數(shù)來(lái)觀察每種菌的生長(zhǎng)情況。三聯(lián)拮抗實(shí)驗(yàn)，將三種益生菌混合后，再分別與四種腸道致病菌混合培養(yǎng)，間隔一定時(shí)間

4、取樣涂平板，記取活菌數(shù)來(lái)觀察每種菌的生長(zhǎng)情況。
　　 5發(fā)酵工藝的研究:運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)法，采用三因素（發(fā)酵時(shí)間、pH值、發(fā)酵溫度）三水平來(lái)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。
　　 結(jié)果:
　　 通過(guò)各種實(shí)驗(yàn)的鑒定，對(duì)已有菌種的特性有個(gè)初步的了解和掌握。耐藥性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)可以看出所選用的菌種并沒(méi)有抗抗生素的特性，尤其是腸球菌，對(duì)萬(wàn)古霉素沒(méi)有抗性，可以正常使用。拮抗實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)腸道致病菌有拮抗作用。
　　 結(jié)論:
　　 通過(guò)各項(xiàng)實(shí)