擴(kuò)張型心肌病與肌聯(lián)蛋白靶基因突變的研究.pdf

1、目的:
　　通過對(duì)患有擴(kuò)張型心肌病，尤其是伴有心律失常病人的血液DNA檢測(cè)，篩選出具有RBM20基因突變的擴(kuò)張型心肌病病人。并在此基礎(chǔ)上，對(duì)其病理機(jī)制進(jìn)行深入地研究。明確RBM20的突變對(duì)肌聯(lián)蛋白的影響，并探討對(duì)擴(kuò)心病的發(fā)生、發(fā)展的影響。爭(zhēng)取建立一個(gè)至少對(duì)家族遺傳性擴(kuò)心病病人的快速而準(zhǔn)確的臨床診斷方法。
　　方法:
　　（1）臨床資料收集：收集2013年至2014內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診內(nèi)科收治擴(kuò)張型心肌病患者3

2、0例臨床資料，參照WHO1995年制定的DCM的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行：
　?、抛笮氖疑溲?jǐn)?shù)（Left Ventricle Ejection Fraction,LVEF）<45％；
　?、谱笮氖沂鎻埬┢趦?nèi)徑（ Left Ventricular End Diastolic dimension，LVEDd）>217cm/㎡，或左心室舒張末期內(nèi)徑（LVEDd）>55mm；
　?、桥懦哐獕翰　⒐谛牟?、酒精性心肌病、肺心病、先心病、心

3、肌炎等其他可能引起繼發(fā)性心臟擴(kuò)張的心血管疾病和全身疾病，結(jié)合其病史，臨床表現(xiàn)、臨床檢驗(yàn)檢查結(jié)果及家族遺傳史等因素進(jìn)行資料收集，確定入選研究對(duì)象。
　?。?）從入選的研究對(duì)象血液中提取基因組DNA(簽訂知情同意書，通過院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)),以研究對(duì)象的DNA為模板，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR反應(yīng)。
　?。?）提取PCR產(chǎn)物，送生物測(cè)序公司進(jìn)行測(cè)序分析，篩選出伴有RBM20突變的研究對(duì)象，明確突變的部位，及突變對(duì)肌聯(lián)蛋白的影響，探討RBM

4、20的突變可能在擴(kuò)張性心肌病發(fā)展和形成中的作用機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　我們?cè)O(shè)計(jì)了RBM209號(hào)外顯子兩對(duì)引物，即檢測(cè)9號(hào)外顯子的不同區(qū)域序列情況。對(duì)30個(gè)樣本擴(kuò)增后測(cè)序結(jié)果與NCBI的dbSNP庫(kù)數(shù)據(jù)分析，顯示在30例樣本中存在一例雜合子。即Rs529262759,AGG/AAG，突變后是基因翻譯氨基酸序列發(fā)生改變，導(dǎo)致RBM20蛋白第684位由組氨酸變成精氨酸。且此攜帶突變患者可能存在家族遺傳史。
　　結(jié)論：