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文檔簡介
1、糖尿病(diabetes mellltus,DM)是臨床上常見的慢性代謝系統(tǒng)疾病,其并發(fā)癥多而復(fù)雜,可涉及多個系統(tǒng)不同臟器的結(jié)構(gòu)和功能的改變。糖尿病周圍神經(jīng)病變(dlabetlc peripheral neuropathy,DPN)是其最常見的并發(fā)癥之一。其發(fā)病機制具有明顯的多樣性和復(fù)雜性,至今尚無任何一種學(xué)說可單獨解釋DPN的病因,而目前認(rèn)為神經(jīng)營養(yǎng)因子(NT)及其相關(guān)受體的減少、缺失或受損是其中一個重要致病環(huán)節(jié)。臨床上患者多見肢體麻
2、痛、感覺異樣,尤其是夜間或遇寒時癥狀加重等表現(xiàn)與中醫(yī)學(xué)上消渴病血虛寒凝證型表現(xiàn)相符。西醫(yī)在治療DPN方面尚缺乏特異性療法,臨床上主要以控制血糖為治療基礎(chǔ),多輔以血管擴張類藥物、神經(jīng)營養(yǎng)類藥物、改善代謝紊亂類藥物及抗氧化劑等藥物進行綜合性治療。但通過臨床觀察,單一應(yīng)用西藥治療DPN在改善臨床癥狀方面效果甚微。而目前采用中西醫(yī)結(jié)合方法治療DPN根據(jù)中醫(yī)辨證分型應(yīng)用當(dāng)歸四逆湯聯(lián)合甲鈷胺療法雖然臨床觀察病例較多,療效較為滿意,但多以宏觀觀察為依
3、據(jù),評價標(biāo)準(zhǔn)尚不統(tǒng)一,客觀療效指標(biāo)較少,相互之間無法進行比較,不利于臨床交流及廣泛應(yīng)用。本實驗就是在中西醫(yī)理論的指導(dǎo)下,運用現(xiàn)代科學(xué)研究方法對此展開相關(guān)靶點蛋白的動物研究。
目的:通過觀察當(dāng)歸四逆湯聯(lián)合甲鈷胺對糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度(nerve conduction veloclty,NVC)和神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)及其酪氨酸蛋白激酶受體(TrkA)的作用,探討當(dāng)歸四逆湯
4、聯(lián)合甲鈷胺用藥對糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)SNCV、MNCV和NGF及其受體TrkA的影響。
方法:選取SPF級健康成年SD雄性大鼠50只,隨機抽取10只大鼠作為正常對照組,將其余40只大鼠進行糖尿病造模,之后隨機分成4組,糖尿病組、甲鈷胺組、當(dāng)歸四逆湯組、當(dāng)歸四逆湯聯(lián)合甲鈷胺組,并對所有大鼠進行一般情況觀察及血糖監(jiān)測。此后,將3個用藥組進行藥物治療12周。在藥物治療前后分別測定5組大鼠足底光熱刺激痛閾時間和坐骨神經(jīng)感覺神
5、經(jīng)傳導(dǎo)速度(SNCV)及運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)。然后,利用免疫組織化學(xué)方法分別檢測5組大鼠坐骨神經(jīng)中NGF及TrkA的表達情況,通過光鏡下觀察雪旺細胞中軸突及其周圍的棕黃色或褐色顆粒陽性表達產(chǎn)物,測定平均光密度值。最后,將所有實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計匯總,各組間比較采用單因素方差分析法。
結(jié)果:1、各組大鼠熱痛覺比較:與正常組相比,在藥物治療前后,糖尿病對照組和3個治療組用藥前后大鼠足底光熱刺激痛閾時間均延長(P<0.01);3
6、個治療組在經(jīng)過12周藥物分別治療后,較糖尿病對照組大鼠足底光熱刺激痛閾時間均明顯縮短(P<0.01);而甲鈷胺組與當(dāng)歸四逆湯組之間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);但聯(lián)合用藥組較其他兩個治療組光熱刺激痛閾時間縮短顯著,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);糖尿病對照組前后兩次對比,12周后時間明顯延長,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
2、各組大鼠坐骨神經(jīng)SNCV、MNCV比較:用藥前后與正常組相比,糖尿病對照組、甲鈷胺
7、組、當(dāng)歸四逆湯組及聯(lián)合用藥組SNCV和MNCV明顯降低,差異明顯有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);經(jīng)過藥物治療12周后,3個用藥組較糖尿病對照組SNCV、MNCV均有提高,其中聯(lián)合用藥組上調(diào)幅度最為顯著,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);同時聯(lián)合用藥組較另外兩單一用藥組也具有明顯差異性,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,P<0.05);而兩單一用藥組之間比較,甲鈷胺組SNCV較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),MNCV無明顯差異,無統(tǒng)計學(xué)意
8、義(P>0.05)。藥物治療前后對比,后期糖尿病對照組SNCV和MNCV均明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
3、各組大鼠坐骨神經(jīng)NGF及TrkA比較:與正常組相比,糖尿病對照組及3個用藥組大鼠坐骨神經(jīng)NGF及TrkA蛋白表達水平均降低(P<0.01,P<0.05);與糖尿病對照組相比,3個用藥組NGF及TrkA蛋白表達水平均有提高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,P<0.05);其中,聯(lián)合用藥組提高顯著,較兩單一用
9、藥組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);兩單一用藥組比較,當(dāng)歸四逆湯組NGF蛋白表達水平比甲鈷胺組略低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而TrkA蛋白表達水平兩組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:1、當(dāng)歸四逆湯聯(lián)合甲鈷胺可提高糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度;
2、當(dāng)歸四逆湯聯(lián)合甲鈷胺可顯著提高糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠坐骨神經(jīng)NGF及TrkA蛋白表達水平,作用效果明顯優(yōu)于單一應(yīng)用甲鈷胺及當(dāng)歸四逆湯
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