納米TiO2及其復(fù)合物與三種蛋白相互作用的研究.pdf

1、目的：
　　在模擬人體生理?xiàng)l件下，以納米TiO2、納米TiO2/SiO2、納米TiO2/Fe3O4和納米TiO2/FA為研究對(duì)象，以溶菌酶、牛血紅蛋白和γ-球蛋白為模型蛋白，采用光譜法、Zeta電位法和比濁法等方法結(jié)合，研究納米TiO2及其復(fù)合物與三種蛋白的相互作用，同時(shí)探討其對(duì)三種蛋白毒性的影響。
　　方法：
　　采用紫外差光譜法觀察納米 TiO2及其復(fù)合物與三種蛋白作用前后紫外吸收光譜的變化；采用熒光光譜法研究納米

2、TiO2及其復(fù)合物對(duì)三種蛋白的熒光猝滅作用機(jī)制，并獲得結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)等相關(guān)參數(shù)及作用力類(lèi)型；利用同步熒光光譜法考察納米TiO2及其復(fù)合物對(duì)三種蛋白構(gòu)象的影響；運(yùn)用圓二色譜法進(jìn)一步考察納米TiO2及其復(fù)合物對(duì)溶菌酶二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響；利用比濁法研究納米 TiO2及其復(fù)合物對(duì)溶菌酶活性的影響；采用Zeta電位法研究納米TiO2及其復(fù)合物與牛血紅蛋白和γ-球蛋白結(jié)合后表面電荷的變化。
　　結(jié)果：
　　紫外差光譜結(jié)果初步顯示，納米

3、TiO2及其復(fù)合物與溶菌酶、牛血紅蛋白和γ-球蛋白均發(fā)生了相互作用。熒光結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，納米 TiO2及其復(fù)合物與三種蛋白均發(fā)生了相互作用，引起三種蛋白內(nèi)源熒光顯著猝滅，且對(duì)三種蛋白的熒光猝滅機(jī)制主要為靜態(tài)猝滅，除了納米 TiO2/SiO2與溶菌酶的作用力為靜電作用外，其余兩者間的作用力均為氫鍵和范德華力；納米 TiO2及其復(fù)合物與三種蛋白均形成1:1基態(tài)復(fù)合物，298 K時(shí)，納米TiO2及其復(fù)合物和三種蛋白的作用力強(qiáng)弱不同，它們與溶菌

4、酶作用力順序?yàn)?TiO2/FA>TiO2/SiO2>TiO2/Fe3O4>TiO2，與牛血紅蛋白作用力順序TiO2/FA>TiO2/SiO2>TiO2>TiO2/Fe3O4，與γ-球蛋白作用力順序?yàn)門(mén)iO2/FA>TiO2>TiO2/SiO2>TiO2/Fe3O4。同步熒光結(jié)果表明，納米TiO2及其復(fù)合物對(duì)三種蛋白的構(gòu)象產(chǎn)生不同程度的影響。圓二色譜結(jié)果證實(shí)，納米 TiO2及其復(fù)合物使溶菌酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生不同程度的改變。比濁法結(jié)果顯示，納