脂氧素A4抑制惡性黑色素瘤生長的動物實(shí)驗(yàn)及免疫學(xué)機(jī)制初步研究.pdf

1、目的：惡性黑色素瘤(malignant melanoma，MM)是來源自人類胚胎時期神經(jīng)嵴黑色素細(xì)胞高度惡性腫瘤，起病隱匿、侵襲性高、易發(fā)生轉(zhuǎn)移，其預(yù)后較差、死亡率極高。隨著MM發(fā)病率的逐漸增高，其極大的危害了人們的健康生活。腫瘤的發(fā)生發(fā)展，與機(jī)體自身免疫狀態(tài)、炎癥微環(huán)境，甚至與腫瘤生長相關(guān)血管異常的表達(dá)，有著極為密切的相關(guān)性。我們實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)發(fā)現(xiàn)脂氧素A4(lipoxin A4，LXA4)可通過重塑腫瘤炎癥微環(huán)境以及下調(diào)多種腫瘤相關(guān)血管

2、生成相關(guān)因子的表達(dá)，來達(dá)到抗MM的作用。但脂氧素A4抗MM作用中的免疫機(jī)制，尚不清楚。本研究旨在通過觀察研究脂氧素A4對MM小鼠T細(xì)胞的作用，闡明其抑制MM生長的免疫機(jī)制。
　　方法：將鼠源性MM細(xì)胞B16通過腹腔接種至C57BL/6小鼠腹部，以此成功構(gòu)建MM動物模型，并通過抽簽法分為磷酸緩沖鹽溶液(PBS)組（對照組）和5S，6R-7-三羥甲基庚酸(BML-111)組（實(shí)驗(yàn)組）各6例，其中BML-111組注射脂氧素A4類似物BM

3、L-111(1mg/kg)進(jìn)行干預(yù)治療，PBS組則注射PBS緩沖液（1mg/kg），兩組均每兩天治療一次，共治療5次，每天觀察記錄腫瘤生長情況，并計算體重增長率。終止試驗(yàn)時，手術(shù)剝離小鼠腫瘤，測量腫瘤體積并稱重，分別計算兩組小鼠腫瘤生長抑制率(tumor growth inhibition rate，IR)并繪制腫瘤生長曲線，通過免疫組織化學(xué)測定腫瘤組織內(nèi)CD8+T、CD4+T細(xì)胞的數(shù)量。手術(shù)剝離小鼠脾臟并抽取小鼠血液，通過流式實(shí)驗(yàn)檢測