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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?用共沉淀法,制備含氟化鈣(CaF2)的硅酸三鈣(3CaO·Si02,C3S)粉末,用其制備骨水泥,研究氟化鈣摻雜對骨水泥固化時(shí)間、模擬體液浸泡pH值和顯微結(jié)構(gòu)的變化,評價(jià)該骨水泥的體外細(xì)胞毒性。
實(shí)驗(yàn)方法:(1)用甘油-乙醇法測定樣品中游離氧化鈣(f-CaO)的含量;用吉爾摩(Gilmore)雙針法測定含氟C3S骨水泥的固化時(shí)間;模擬體液(SBF)中浸泡后,測定浸泡液pH值隨浸泡時(shí)間的變化,并結(jié)合SEM和XRD微
2、觀結(jié)構(gòu)的觀察,對骨水泥在模擬體液浸泡過程中品相的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行描述。(2)用細(xì)胞培養(yǎng)法觀察不同含氟量骨水泥的浸提液對L929細(xì)胞形態(tài)的影響,MTT試驗(yàn)評價(jià)含氟化鈣骨水泥的體外細(xì)胞毒性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)相同實(shí)驗(yàn)條件下,加入CaF2能有效降低C3S粉末中f-CaO的含量。(2)隨著CaF2含量的增加,骨水泥固化時(shí)間延長,不含CaF2的C3S樣品初凝時(shí)間為92min,終凝時(shí)間為149min,CaF2添加量為1.5wt%時(shí),其初凝
3、時(shí)間增加到141min,終凝時(shí)間為246min。(3)與C3S骨水泥相比,含CaF2的骨水泥在SBF中浸泡初期有較低的pH,隨浸泡時(shí)間的延長,兩種浸泡液的pH均下降,且趨于一致,pH值都接近中性;(4)XRD和SEM表明,骨水泥經(jīng)過水化反應(yīng)后可以生成C-S-H和CDHA,生成量與CaF2含量、固化液組成有關(guān)。(5)細(xì)胞培養(yǎng)24h時(shí)倒置相差顯微鏡下觀察苯酚陽性對照組幾乎無活細(xì)胞,多為懸浮、細(xì)胞核固縮的死亡細(xì)胞,陰性對照組及實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞貼壁生
4、長良好,多已充分伸展,呈梭形或不規(guī)則三角形,兩組細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)無明顯差異;120h時(shí)實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組細(xì)胞均生長旺盛,呈密集排列,兩組細(xì)胞間隙顯著減小。(6)細(xì)胞培養(yǎng)在添加含CaF2量為0wt%、0.6wt%和1.5wt%的C3S骨水泥不同濃度浸提液分別與陰性對照組相比,均無明顯毒性。第3d時(shí),CaF2量為1.5wt%的C3S骨水泥50%的濃度浸提液作用下,與陰性對照組相比,細(xì)胞增殖率有顯著提高,第Sd時(shí),CaF2量為1.5wt%的C3
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