PTE患者吞噬細(xì)胞及NK細(xì)胞相關(guān)基因mRNA差異性表達(dá)的意義.pdf

1、靜脈血栓栓塞癥(venous thromboembolism，VTE)是一種環(huán)境和/或遺傳因素參與的常見病、多發(fā)病。近年，有學(xué)者提出炎癥免疫反應(yīng)在VTE的發(fā)病機(jī)制中可能發(fā)揮重要作用。吞噬細(xì)胞及NK細(xì)胞作為重要的非特異性免疫細(xì)胞及炎癥因子的效應(yīng)細(xì)胞，其在炎癥及免疫調(diào)節(jié)中的作用逐漸引起研究者的興趣。
　　 目的:應(yīng)用人類全基因組表達(dá)譜芯片技術(shù)檢測(cè)吞噬細(xì)胞及NK細(xì)胞相關(guān)基因mRNA在PTE中的表達(dá)水平，探討兩者在PTE中可能的作用。<

2、br>　　 方法:隨機(jī)收集20例PTE患者及20例性別、年齡與之匹配的對(duì)照者，抽取外周血單個(gè)核細(xì)胞總RNA，合成Cy3標(biāo)記的PTE組和對(duì)照組的cRNA探針，與Agilent人類全基因組oligo芯片雜交。雜交后進(jìn)行圖像掃描，并使用GeneSpringGX數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)基因芯片原始信號(hào)值進(jìn)行熒光、背景、標(biāo)準(zhǔn)化參數(shù)設(shè)定及穩(wěn)健多芯片平均標(biāo)準(zhǔn)化分析處理。將PTE組與對(duì)照組標(biāo)準(zhǔn)化基因信號(hào)強(qiáng)度采用兩類樣本比較隨機(jī)方差參數(shù)T檢驗(yàn)，篩選吞噬細(xì)胞及NK

3、細(xì)胞相關(guān)基因mRNA表達(dá)信息，顯著差異基因篩選標(biāo)準(zhǔn)為p＜0.05。采用FQ-PCR對(duì)部分基因的芯片檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)以驗(yàn)證基因芯片的可靠性。
　　 結(jié)果:檢測(cè)出吞噬細(xì)胞相關(guān)基因mRNA表達(dá)條帶8條(CD11a、CD14、CD16b、CD32a、CD32b、CD35、MRC2、SCRAB1)，且PTE組mRNA表達(dá)均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。檢測(cè)出NK細(xì)胞相關(guān)基因mRNA片段18條：與對(duì)照組相比，PTE組殺傷細(xì)胞

4、凝集素樣受體(KLR)、殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)及自然細(xì)胞毒受體(NCR)mRNA表達(dá)呈下調(diào)趨勢(shì)，KIRmRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；KLR中KLRC2、KLRC4mRNA表達(dá)呈下調(diào)趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);KLRB1、KLRC1、KLRC3、KLRD1、KLRF1、KLRG1、KLRK1mRNA表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);NCR中NCR1mRNA表達(dá)顯著下調(diào)(P＜0.01)，N