轉(zhuǎn)化生長因子-β信號通路在異氟醚后處理誘導(dǎo)大鼠腦保護(hù)機制中的作用.pdf

1、目的：
　　觀察異氟醚后處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，應(yīng)用TGF-β信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白的特異性抑制劑研究TGF-β1信號通路與下游c-Jun氨基末端激酶（JNK）信號通路在其保護(hù)機制中的作用。
　　方法：
　　制備SD大鼠大腦中動脈栓塞模型建立腦缺血再灌注損傷，缺血90分鐘再灌注24小時，在再灌注開始時間點進(jìn)行異氟醚后處理（吸入濃度為1MAC、2MAC及3MAC）1小時。在實施腦缺血再灌注損傷模型術(shù)前3

2、0分鐘應(yīng)用不同抑制劑（TGF-β1抑制劑 LY2157299、JNK1/2抑制劑SP600125）。TTC染色及神經(jīng)行為學(xué)評分判斷神經(jīng)損傷程度。碘化丙啶熒光染色和TUNEL法細(xì)胞凋亡染色觀察腦海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡情況。免疫熒光技術(shù)觀察大鼠海馬CA1區(qū)TGF-β1蛋白的表達(dá)。Western blot技術(shù)檢測各組大鼠海馬組織TGF-β1、Smad2/3及磷酸化Smad2/3、JNK1/2及磷酸化JNK1/2的表達(dá)量。
　　結(jié)果：

3、>　?。?）1MAC、2MAC異氟醚組較I/R組神經(jīng)行為學(xué)評分降低，腦損傷面積減少（P<0.05）。3MAC異氟醚組神經(jīng)行為學(xué)評分及腦損傷面積與I/R組無明顯差異（P>0.05），較IMAC、2MAC異氟醚組顯著增高（P<0.05）。TGF-β1在缺血再灌注損傷后表達(dá)增加（P<0.05），在1MAC的異氟醚后處理組中表達(dá)最高（P<0.05）。應(yīng)用TGF-β1特異性抑制劑LY2157299后，神經(jīng)行為學(xué)評分增高，腦損傷面積擴大，TGF-β

4、1的表達(dá)下調(diào)（P<0.05）。
　?。?）p-JNK1/2在腦缺血再灌注損傷后表達(dá)水平明顯升高（P<0.05）。在異氟醚組的表達(dá)量明顯降低（P<0.05），1MAC異氟醚組較其它濃度的異氟醚組下降更明顯（P<0.05），各組非磷酸化的JNK1/2表達(dá)均無明顯變化（P>0.05）。
　?。?）應(yīng)用LY2157299后，p-JNK1/2的表達(dá)顯著增加（P<0.05），未注射LY2157299，p-JNK的表達(dá)顯著下降（P<0.0

5、5）。同時注射LY2157299和SP600125后，p-JNK和TGF-β1的表達(dá)均下降（P<0.05）。單獨使用SP600125，p-JNK的表達(dá)顯著下降（P<0.05），但TGF-β1的表達(dá)無明顯變化（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　?。?）異氟醚后處理對腦缺血再灌注損傷具有神經(jīng)保護(hù)作用，這種保護(hù)作用不成劑量依賴性。
　?。?）TGF-β1信號通路參與了異氟醚后處理的神經(jīng)保護(hù)機制，這種作用可能與TGF-β1抑制J