甲狀腺激素對(duì)GLUT4的影響及其與心磷脂關(guān)系的研究.pdf

1、課題組前期的研究結(jié)果表明，甲亢性心臟功能變化與心磷脂關(guān)系密切，本研究擬從GLUT4(Glucose transporter4，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4)變化的角度進(jìn)一步探討心磷脂在甲亢中的作用。
　　心臟作為一個(gè)高能量代謝的組織，主要通過線粒體中氧化磷酸化產(chǎn)生ATP來提供能量，并且對(duì)葡萄糖體現(xiàn)出高度依賴性。而GLUT4是糖轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白家族中的一員，在葡萄糖的非ATP-依賴膜轉(zhuǎn)運(yùn)過程中起著重要作用。因此，對(duì)于以高代謝為主要變化的甲亢，探討GL

2、UT4是有必要的。而且，文獻(xiàn)報(bào)道甲狀腺激素可促進(jìn)心肌組織中GLUT4[3]的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)對(duì)葡萄糖的利用[1,2]來滿足心臟基礎(chǔ)代謝率升高對(duì)能量的需求[4,5]。但是，GLUT4只有從胞漿中轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上才能介導(dǎo)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)過程，因此，本研究擬進(jìn)一步探討:(1)細(xì)胞膜上GLUT4的含量以及細(xì)胞中GLUT4的分布在甲狀腺激素作用下會(huì)有怎樣的變化。(2)CLS（cardiolipin synthetase，心磷脂合酶）低表達(dá)是否對(duì)上述變化有

3、影響。(3)CL(cardiolipin，心磷脂)中脂肪酸的飽和度不同是否對(duì)上述GLUT4的變化有影響。
　　研究結(jié)果如下:
　　(1)在體和離體實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:T4作用下心室和H9c2細(xì)胞GLUT4在蛋白和基因水平的表達(dá)增加，表明:T4可促進(jìn)心室和H9c2細(xì)胞中GLUT4表達(dá)。
　　(2) HA-GLUT4 H9c2細(xì)胞體外T4處理，通過激光共聚焦手段獲得熒光圖像并統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示:T4作用下細(xì)胞膜上GLUT4的含量

4、增加，并且在細(xì)胞膜上的相對(duì)分布水平提高。表明:T4可促進(jìn)H9c2細(xì)胞中GLUT4在細(xì)胞膜上的含量和其在細(xì)胞膜上的相對(duì)分布量。
　　(3) H9c2細(xì)胞體外給藥CL(14∶0/18∶1/18∶2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:CL作用下H9c2細(xì)胞中GLUT4在蛋白和基因水平的表達(dá)增加。表明:CL可促進(jìn)H9c2細(xì)胞中GLUT4的表達(dá)。
　　(4) HA-GLUT4 H9c2細(xì)胞體外CL(14∶0/18∶1/18∶2)處理，通過激光共聚焦手段獲

5、得熒光圖像并統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示:CL作用下H9c2細(xì)胞膜上GLUT4的含量增加，并且在細(xì)胞膜上的相對(duì)分布水平提高。表明:CL可促進(jìn)H9c2細(xì)胞中GLUT4在細(xì)胞膜上的含量和其在細(xì)胞膜上的相對(duì)分布量，并且不同飽和度CL作用之間不存在顯著差異。
　　(5)CLS低表達(dá)的HA-GLUT4 H9c2細(xì)胞加入T4處理的同時(shí)加入外源性心磷脂進(jìn)行處理，結(jié)果表明:T4作用下CLS低表達(dá)的H9c2細(xì)胞中GLUT4在細(xì)胞膜上的分布顯著降低，加入外源性