南極擬三列真蘚MBF1基因的抗逆機制研究.pdf

1、在自然界中，低溫、土壤鹽堿化、干旱、水澇等會對植物的生長和生存產(chǎn)生不利的影響，并限制全球的農(nóng)作物地域性分布和糧食產(chǎn)量，這些環(huán)境因素被稱為逆境。轉錄因子和調節(jié)基因是介導植物對逆境脅迫適應的主要因素。轉錄輔激活因子與轉錄因子的活性密切相關，它能通過增強轉錄因子與順式作用元件相結合，達到增強轉錄活性的目的。MBF1就是一個轉錄輔激活因子，它在進化上是高度保守的。MBF1參與了包括激素調節(jié)的脂類代謝、中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、內皮細胞分化和組氨酸新陳代

2、謝等不同的生物進程。不同生物體內的MBF1蛋白通過與GCN4、c-Jun、ATF1或其他核受體相互作用與TBP連接，最后激活基因的轉錄。
　　本研究采用RACE-PCR的方法從南極擬三列真蘚(Bryum pseudotrique)中分離得到了MBF1基因，其大小為447bp，并將其命名為BpMBF1。將其與已發(fā)表的其他生物MBF1氨基酸序列進行同源性比較，發(fā)現(xiàn)具有較高的同源性。蛋白質三維結構預測分析結果顯示BpMBF1和AtMBF

3、1c其蛋白質C-末端結構相似性較高，因此本研究同時還克隆了擬南芥的AtMBF1c基因?？寺〉交蚝?，我們構建了植物雙元超表達載體pBI121-BpMBF1和pBI121-AtMBF1c，載體上包含35S啟動子和NOS終止子。通過農(nóng)桿菌介導的花序侵染法，將CaMV35S啟動子調控下的BpMBF1和AtMBF1c轉入模式植物擬南芥Col野生型。同時還將BpMBF1和AtMBF1c轉入Atmbf1c純合突變體中以互補表型。對野生型、突變體、過

4、表達和突變體互補表型植株施加鹽脅迫和冷脅迫，結果表明BpMBF1在逆境脅迫中發(fā)揮了重要功能。并且在響應冷脅迫過程中BpMBF1從細胞質轉移到了細胞核中。利用酵母雙雜交鑒定出了包括組蛋白H3(Histone H3)、脫氫酶(Dehydrogenase)以及?；o酶A合成酶(Acyl-CoA synthetase)等23個與BpMBF1相互作用的基因，這些基因編碼的蛋白中有多個與蛋白質和糖類的代謝有關，這一結果表明BpMBF1可能通過調節(jié)這