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1、目的:觀察選擇性阻斷cGMP依賴性蛋白激酶(cGMP-dependent protein kinase,PKG)對(duì)內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,LPS)孵育的大鼠血管環(huán)收縮功能的影響,并比較兩種特異性PKG抑制劑DT-2和(D)-DT-2對(duì)恢復(fù)LPS孵育的大鼠血管環(huán)低反應(yīng)性作用的大小。
研究方法:實(shí)驗(yàn)Ⅰ取SD大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán),隨機(jī)分為四組:對(duì)照組(saline)、LPS組(LPS75μg/mL)、LNAM
2、E組(LPS75p.g/mL+L-NAME10-1mmol/L)以及DT2組(LPS75μg/mL+DT-22×10-3mmol/L)。在體外測(cè)定LPS孵育2h,3h,4h后各組血管環(huán)在苯腎上腺素(PE)作用下收縮的濃度效應(yīng)曲線、最大收縮力(Emax)以及產(chǎn)生最大收縮力的半數(shù)有效濃度(EC50)。
實(shí)驗(yàn)Ⅱ首先取SD大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán),隨機(jī)分為3組(n=5):Saline組、DT2組和DDT2組,用5×10-2mmol/L的
3、8-Br-cGMP擴(kuò)張血管后加入上述各藥,比較各組血管環(huán)的張力變化。然后將SD大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)隨機(jī)分為四組(n=5):Control組、LPS組、LPS-DT2組以及LPS-DDT2組,在體外測(cè)定LPS孵育3h時(shí)各組血管環(huán)在苯腎上腺素(PE)作用下收縮的濃度效應(yīng)曲線、最大收縮力(Emax)以及產(chǎn)生最大收縮力的半數(shù)有效濃度(EC50)。
研究結(jié)果:實(shí)驗(yàn)Ⅰ LPS孵育后各時(shí)間點(diǎn)血管環(huán)的收縮濃度效應(yīng)曲線與對(duì)照組比較明顯降低(P
4、<0.05)。L-NAME可以提高LPS孵育2h,3h,4h時(shí)血管環(huán)的收縮功能,LNAME組Emax,Ec50較LPS組差異明顯(P<0.05)。DT-2可以顯著提高LPS孵育3h時(shí)血管環(huán)的收縮功能(P<0.01),兩組Emax,EC50有顯著差異(P<0.01),但在2h,4h時(shí),DT2組與LPS組血管環(huán)收縮的濃度效應(yīng)曲線比較沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
實(shí)驗(yàn)Ⅱ PKG抑制劑DT-2和(D)-DT-2能夠使8-Br-cGMP舒張的血
5、管環(huán)收縮,DDT2組血管環(huán)的Emax明顯高于DT2組(P<0.05)。DT-2和(D)-DT-2都可以顯著提高LPS孵育3h的血管環(huán)的收縮功能,EmaxEC50較LPS組差異顯著(P<0.01)。LPS-DDT2組與LPS-DT2組相比Emx明顯增加,EC50明顯減小(P<0.05)。
結(jié)論:選擇性阻斷cGMP依賴性蛋白激酶可以部分恢復(fù)LPS孵育的大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的收縮功能。PKG抑制劑(D)-DT-2恢復(fù)血管反應(yīng)性的作
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