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1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文固氮芽孢桿菌的分離鑒定以及固氮巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)C4在玉米、水稻、小麥上的定殖研究姓名:劉旭明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:陳三鳳20050601AbstractBacillusmegateriumC4,anitrogenfixingbacterium,wasmarkedwith咖geoeMaize,riceandwheatseedlingswereinoculate
2、dwiththeGFPlabeled且megateriumC4andthengrowningnotobioticcondition,Themaizeroots,stems,leaves,decfoolsandwheatrootswereopticallysectionedandobservedunderconfoeallaserscanningmicroscopeObservationsofthemakerootsectionsat1,
3、3,5,7,9and11daysafterinoculationshowedsignificantlytheinfectionprocessthatthebacterialcellsinfectedthemalzerootsfromtherootsurfacestothestelesOnedayafterinoculation,thebacteriacolonizedmainlythe汕rfacesofprimaryandlateral
4、roots,andthejunctionsbetweenprimaryrootandlateralrootThreedaysafIcrinoculation,thebacterialcellscolonizedcortexesFivedaysafterinoculation,thebacteriahadprogressedtowardsinnercortexSevendaysafterinoculation,thebacteriarea
5、chedvascularsteleandpenetratedintoxylemandpith1kbacteria、Ⅳ盯emainlylocatedintheintercellularspaecsalthoughafewbactexialcellsalsoⅥ℃mpresentwithinthexylemvesselsroothair∞ns,epidermis,corticalparenchymaandpithcellsAprobables
6、iteofeutryintomaizerootsforthebacteriawascracksformedatthelateralrootjunctionsMicroscopicobservationsofthesectionsofmaizestemsandleavesat30and40daysafterinoculationrevealedthatthebacteriawerepresentinstemsandleavesat30an
7、d40daysaftelinoculation,indicatingthatthebacteriamigratedslowlyfromtootstostemsandleavesColonizationstudiesofricelOOtSandwheatrootsat1,3,5,7daysafterinoculationrevealeddearlytheinfectionprocessonriecrootsandwheatrootswas
8、similartothatonmaizeroots,andthebacterialcellswerefoundtocolonizeepidermiscortexandvasculartissuesofricerootandwheatrootItalsoindicatedthatthemottip蛔thezoneofelongationandthejunctionsbetweentheprimaryandthelateralrootswe
9、rethetwositesforthebacteriaenuyinticerootThepopulationofthebacterialcellscolonized抽themaizerootsstemsandleavesWeTgestimatedbycountingcolonyformingunitsonselectivemedium11他populationinrootsreached1礦。cFu/gFWat3daysafterino
10、culationandgraduallyincreasedto10’。CFU/gFWat9daysafIerinoculationAt30daysafterinoculationthebacterialpopulationreached10&2CFU/gFWinleavesand104‘3cexvgFWinstems。Soilsamplesofdiffe犯utplantrhlzosphe∞werecollectedkomfifteenp
11、rovincesThe!/vcetemadeintosuspensionsandseethedfor15aria,thenplatedonnitrogenfleemediuminordertoisolatenitrogen—fixingbacillusColonyPCRw∞usedtoamplifyn//Hgenesegmentandnitrogenaseactivitywasdeterminedbyacetyleeereduction
12、method116strainsofnitrogenfLxingbacilluswhichbo也have^d曰geaesegmentandnitrogenaseactivitywereacquired,andnitrogenaseactivitiesof7strainsexceededthatoftypestrainPazotoflxonsDSMl735Keywords:BacillusmegateriumCA;GFPlabcled;c
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