不同劑量大豆苷元對(duì)去勢(shì)大鼠血脂和肝臟LDLR表達(dá)的影響及其與雌激素受體的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　 隨著植物雌激素在圍絕經(jīng)期婦女中的廣泛應(yīng)用,有關(guān)它的研究也越來越多。關(guān)于植物雌激素,特別是大豆異黃酮類對(duì)血脂的作用引人注目。但關(guān)于不同劑量大豆苷元對(duì)血脂的影響及其與雌激素受體的關(guān)系方面還有待研究。
　　 第一部分不同劑量大豆苷元對(duì)去勢(shì)大鼠血脂和肝臟Ers和LDLR表達(dá)的影響
　　 目的：
　　 研究不同劑量大豆苷元對(duì)去勢(shì)大鼠血脂指標(biāo)和肝臟雌激素受體、LDLRmRNA表達(dá)的影響,探討大豆苷元

2、對(duì)去勢(shì)大鼠血脂的作用及其可能的機(jī)制。
　　 方法：
　　 取4月齡SD雌性大鼠(由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供),隨機(jī)分為6組:去勢(shì)組(行雙側(cè)卵巢切除ovariectomy,OVX)、假手術(shù)組(Sham)、去勢(shì)+戊酸雌二醇組(E2,戊酸雌二醇800μg/kg·d)、去勢(shì)+高劑量大豆苷元組(H-Dai,大豆苷元200mg/kg·d)、去勢(shì)+中劑量大豆苷元組(M-Dai,大豆苷元50 mg/kg·d)和去勢(shì)+低劑量大豆苷元組(L-

3、Dai,大豆苷元10 mg/kg·d)。去勢(shì)組于術(shù)后1周起行陰道脫落細(xì)胞涂片,連續(xù)5天均未出現(xiàn)角化細(xì)胞為手術(shù)成功。假手術(shù)大鼠即將4月齡SD大鼠雙側(cè)腹下區(qū)進(jìn)腹取少量脂肪組織后關(guān)腹。術(shù)后4周開始以相應(yīng)的藥物灌胃,3個(gè)月后處死大鼠。取血清檢測(cè)甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c),取同一部位肝臟組織檢測(cè)雌激素受體和低密度脂蛋白受體(LDLR)的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、血清L

4、DL-c:OVX組血清LDL-c濃度明顯升高,與Sham組比較差異顯著,E2組、M-Dai組和H-Dai組LDL-c下降,與OVX組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,L-Dai、M-Dai和H-Dai組LDL-c隨劑量增加呈下降趨勢(shì),各組之間的差別有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、血清TG:E2組血清TG升高,與Sham組和OVX組相比有顯著差別,H-Dai組TG降低,與Sham組和OVX組相比差異有顯著性,H-Dai組TG低于M-Dai組和L

5、-Dai組,且有顯著性差異。
　　 3、血清HDL-c:OVX組血清HDL-c明顯低于Sham組和E2組,Sham組與E2組相比無明顯差異,各大豆苷元組與OVX組無明顯差異,卻顯著低于Sham組。
　　 4、Erα和ERβRNA水平:OVX組肝臟Erα mRNA表達(dá)下降,與Sham組和E2組相比差異顯著,M-Dai組、H-Dai組Erα mRNA表達(dá)增加,與OVX組相比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,L-Dai組、M-Dai組和H-D

6、ai組Erα mRNA表達(dá)量呈增加趨勢(shì),L-Dai組、M-Dai組與H-Dai組差異顯著。
　　 5、LDLR mRNA水平:OVX組肝臟LDLR mRNA表達(dá)下降,與Sham組和E2組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,L-Dai組、M-Dai組和H-Dai組LDLR mRNA表達(dá)逐漸增加,L-Dai組、M-Dai組與H-Dai組差異顯著,且M-Dai組、H-Dai組與OVX組相比表達(dá)增加,有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：
　

7、　 1、大豆苷元對(duì)去勢(shì)大鼠血脂有一定的有益作用,且大豆苷元對(duì)LDL-c的影響具有劑量依賴性,劑量越高,作用越強(qiáng)。大豆苷元組對(duì)血清HDL-c無明顯影響。
　　 2、各組均未檢測(cè)到Erβ的表達(dá)。中、高劑量大豆苷元可升高去勢(shì)大鼠肝臟Erα和LDLR mRNA的表達(dá)。
　　 3、大豆苷元對(duì)去勢(shì)大鼠血清LDL-c的降低作用和對(duì)肝臟Erα、LDLR表達(dá)增加的影響是一致的,都是隨著劑量的增加其作用更明顯,推測(cè)大豆苷元降低去勢(shì)大鼠血清

8、LDL-c的作用可能主要是通過Erα途徑增加肝臟LDLR的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的
　　 第二部分大豆苷元對(duì)HepG2細(xì)胞LDLR表達(dá)的影響及與ER的關(guān)系
　　 目的：
　　 研究一定濃度大豆苷元對(duì)HepG2細(xì)胞LDLR表達(dá)的影響與ER的關(guān)系。
　　 方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)選用HepG2細(xì)胞,用MTT法確定大豆苷元半數(shù)抑制濃度,用此濃度范圍內(nèi)的不同濃度作用于細(xì)胞,用western-blot檢測(cè)LDLR表達(dá)的變化

9、,然后在用IC1182780和MPP分別阻斷雌激素受體和雌激素受體α后再次用western-blot檢測(cè)LDLR表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、分別與對(duì)照組和10-9大豆苷元組相比,10-7大豆苷元組和10-5大豆苷元組Erα和LDLR表達(dá)增加,且10-5大豆苷元組Erα和LDLR表達(dá)高于10-7大豆苷元組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、與10-5大豆苷元組相比,大豆苷元+ICI182780組和大豆苷元+MPP