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文檔簡介
1、目的:研究TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達及其在膠質(zhì)瘤細胞中對腫瘤生物學特征的影響,旨在尋找與膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展相關的新的靶基因。
方法:
(1)運用Western blot方法,檢測在人正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織中TRA2β的表達情況;收集80例膠質(zhì)瘤手術標本,應用免疫組化方法檢測TRA2β和增殖指標Ki-67的表達情況,將兩者的表達情況與患者的臨床病理因素進行相關性分析。通過Kaplan-Meier法分析TRA2β的表達
2、與膠質(zhì)瘤患者的生存率之間的相關性;(2)選取高表達TRA2β的膠質(zhì)瘤細胞株作為研究對象,建立血清饑餓釋放模型,處理后運用Western blot方法檢測TRA2β蛋白表達水平變化,探究其在膠質(zhì)瘤細胞增殖中的潛在作用。
(3)通過小干擾的方式下調(diào)細胞中TRA2β的內(nèi)源性表達,然后采用細胞流式分析、CCK-8、Transwell等方法檢測TRA2β表達的下調(diào)對細胞周期、增殖以及遷移的影響。
結(jié)果:
?。?)Wes
3、tern blot及免疫組化均顯示,TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達明顯增高。統(tǒng)計學分析提示TRA2β的表達強度與膠質(zhì)瘤組織學分級之間的關系有統(tǒng)計學意義(P<0.05),相關性分析表明TRA2β與Ki-67表達呈正相關(r=0.440;P<0.045);Kaplan-Meier分析顯示TRA2β在膠質(zhì)瘤中的高表達與患者低生存率的顯著相關(P<0.01);
(2)通過血清饑餓的方式使膠質(zhì)瘤細胞生長周期停滯,血清釋放后刺激細胞增殖;
4、Western blot結(jié)果顯示TRA2β﹑PCNA等蛋白隨著細胞周期的進展表達增加;siRNA分析顯示,TRA2β表達的下調(diào)可引起PCNA、cyclin A表達降低,同時使細胞周期的停滯、增殖水平及遷移能力的下降。
結(jié)論:
?。?)TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中表達增加;TRA2β的高表達增加腫瘤分級正相關并提示不良預后;說明TRA2β可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展相關。
?。?)TRA2β的表達在血清饑餓的膠質(zhì)瘤細胞中逐
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