表面活性劑對β-葡萄糖苷酶催化合成紅景天苷的影響.pdf

1、糖苷類化合物作為一類具有較高生理活性和藥理活性的糖類藥物，歷來都是藥物化學的一個研究熱點領(lǐng)域。紅景天苷系糖苷類藥物中的一類典型化合物，具有抗疲勞、抗衰老等優(yōu)良的藥理活性。目前，被用于藥物使用的紅景天苷主要是從植物中提取獲得，但植物中紅景天苷有效成分含量偏低，遠不能滿足市場需求，這就亟需探索出高效制備紅景天苷的途徑以滿足市場需求。迄今為止，人工制備獲取紅景天苷的方法有化學合成法、愈傷組織培養(yǎng)合成、生物催化合成等，其中，生物催化合成以其具有

2、獨特的高立體、區(qū)域選擇性，操作簡單，反應(yīng)條件溫和等特點而受到廣大研究者的親睞。近年來，介質(zhì)工程研究成為生物催化合成的熱門領(lǐng)域，尤其圍繞以離子液體作為新型、綠色的反應(yīng)介質(zhì)的酶促反應(yīng)，進行了廣泛的探索研究。
　　 研究表明，表面活性劑在酶促反應(yīng)中具有維持酶活性等方面的功效，但表面活性劑對酶催化反應(yīng)的影響研究主要涉及脂酶，纖維素酶，磷脂酶等酶促反應(yīng)，而在糖苷類化合物的催化合成反應(yīng)中的應(yīng)用卻鮮見報道?；谏鲜鼍売桑菊撐脑诩兯?、水-有

3、機兩相體系反應(yīng)介質(zhì)中分別引入了不同類表面活性劑，考察了它們對β-葡萄糖苷酶活性的影響變化，以及各自反應(yīng)體系中對酶催化反應(yīng)底物轉(zhuǎn)化率的影響。此外，鑒于非離子表面活性劑吐溫-20(Tween20)表現(xiàn)出優(yōu)良的維持酶活穩(wěn)定性功效，課題制備了吐溫-20-酶復合物，在水-有機單相體系中考察了該復合物酶活性的變化。
　　 實驗發(fā)現(xiàn)，在純水相中，表面活性劑表現(xiàn)出一定的抑制酶失活的作用，其中以吐溫-20的維活效果最為明顯，當Tween20的添加

4、濃度為10g/L時，在50℃下反應(yīng)6天后仍檢測到高達79.7％的余酶活量值。非離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)和十二烷基磺酸鈉(SDS)表現(xiàn)出的抑制酶失活的作用略低于Tween20。受體系中多種因素的影響，在分別添加有CTAB和Tween20的反應(yīng)組中，底物轉(zhuǎn)化率均提高了1.5倍。
　　 在水-有機兩相體系中，SDS對酶的失活體現(xiàn)出最為有效的抑制作用，其余表面活性劑均對酶失活起了不同程度的加速作用。在幾類表面活性劑

5、各自最適添加濃度下，CTAB，SDS，Tween20三組均將底物轉(zhuǎn)化率從9.2％提高到11％左右。不添加表面活性劑所測得的初始反應(yīng)速率最高，Tween20組次之，離子型表面活性劑添加組最低。對于SDS添加組，當反應(yīng)介質(zhì)體系中含水量為10％時，底物轉(zhuǎn)化率可以達到22.3％。
　　 通過分離純化，從枯草芽孢桿菌中得到一類脂肽表面活性劑。在水相體系中研究了它對β-葡萄糖苷酶酶活的影響。另以緩沖液-正己烷為反應(yīng)體系，考察了脂肽對酶催化合