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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:用ω-3多不飽和脂肪酸制劑(ω-3PUFA)魚油預(yù)處理重癥急性胰腺炎(SAP)大鼠,觀察預(yù)處理大鼠胰腺組織損傷程度和炎癥介質(zhì)的變化,探討ω-3多不飽和脂肪酸的可能作用機(jī)制。
方法:健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)實(shí)驗(yàn)大鼠63只,體重230士20g,隨機(jī)分為四組:重癥急性胰腺炎生理鹽水組(N組,n=18);重癥急性胰腺炎魚油干預(yù)組(Y組,n=18);重癥急性胰腺炎英脫利匹特干預(yù)組(Z組,n=18):假手
2、術(shù)組(J組,n=9)。在大鼠重癥急性胰腺炎模型誘導(dǎo)前,N組、Y組和Z組分別皮下注射生理鹽水、魚油和英脫利匹特(劑量2ml/kg/d),連續(xù)注射6天。然后均應(yīng)用3.5%牛磺膽酸鈉(用藥劑量2ml/kg,注射速度0.2ml/min)逆行胰膽管注射法誘導(dǎo)SAP模型;在手術(shù)前J組皮下注射生理鹽水(劑量2ml/kg/d),連續(xù)注射6天,手術(shù)僅開腹后輕輕翻動(dòng)十二指腸和胰腺,關(guān)腹。各組分別于術(shù)后3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)處死大鼠,收集血清、血漿和胰腺組
3、織標(biāo)本。測(cè)定血清淀粉酶活性;ELISA法測(cè)定血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素23(IL-23)
水平;ELISA法測(cè)定血漿中血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素Fla(6-keto-PGFla)、選擇性剪切體組織因子(asTF)和選擇性剪切體組織因子途徑抑制物(asTFPI)的濃度;制作胰腺標(biāo)本,HE染色用于胰腺組織損傷的病理學(xué)評(píng)價(jià);Real-timePCR法檢測(cè)胰腺組織中選擇性剪切體組織因子asTF-mRNA和
4、全長(zhǎng)組織因子flTF-mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
(1)使用魚油預(yù)處理后顯著降低了SAP大鼠血清淀粉酶活性、TNF-α和IL-23水平(P<0.05)。血漿TXB2水平和TXB2/6-keto-PGFla比值在6小時(shí)、12小時(shí)較N組和Z組顯著減低(P<0.05)。無論是肉眼還是光鏡下觀察,魚油預(yù)處理均顯著減輕重癥急性胰腺炎大鼠胰腺損傷程度,胰腺組織損傷病理學(xué)評(píng)分顯著下降(P<0.05)。
(2)J
5、組大鼠血漿asTF水平和asTF/asTFPI比值明顯低于N組、Y組和Z組(P<0.05)。在牛磺膽酸鈉誘導(dǎo)后SAP大鼠血漿asTF水平和asTF/asTFPI比值明顯升高,6小時(shí)達(dá)到高峰,并持續(xù)到12小時(shí)。與N組和Z組相比,Y組血漿asTF和asTF/asTFPI比值顯著減低(P<0.05)。魚油在各時(shí)間點(diǎn)均顯著降低了SAP大鼠血漿asTF水平和asTF/asTFPI比值。
(3)Real-timePCR檢測(cè)結(jié)果顯示J組
6、大鼠胰腺組織asTF-mRNA和flTF-mRNA低表達(dá),在?;悄懰徕c誘導(dǎo)后SAP大鼠胰腺組織asTF-mRNA和flTF-mRNA表達(dá)顯著增強(qiáng)(P<0.05),一直持續(xù)到12小時(shí)。胰腺組織asTF-mRNA表達(dá)與胰腺組織病理損傷Sehmidt評(píng)分顯著相關(guān)(P<0.01)。與N組和Z組相比,Y組胰腺組織asTF-mRNA表達(dá)顯著下調(diào)(P<0.05),flTF-mRNA表達(dá)無顯著差異(P>0.05)。魚油在各時(shí)間點(diǎn)均顯著降低了SAP大鼠胰
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