長(zhǎng)鏈非編碼RNA BCYRN1在食管鱗癌中的表達(dá)水平及其生物學(xué)功能的研究.pdf

1、食管癌是來(lái)源于食管上皮組織的惡性腫瘤，是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。我國(guó)是食管癌發(fā)病率較高的國(guó)家，據(jù)統(tǒng)計(jì)2015年我國(guó)約有47.7萬(wàn)例新診斷病例和37.5萬(wàn)例死亡病例。食管癌主要分為鱗狀細(xì)胞癌和腺癌兩種組織學(xué)亞型，食管鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是我國(guó)的主要組織學(xué)亞型。食管癌由于早期癥狀不典型，當(dāng)出現(xiàn)進(jìn)食吞咽困難癥狀時(shí)已處于中晚期且錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)機(jī)。盡管目前的診斷技術(shù)、圍手術(shù)期的處

2、理和放化療方面較前改善，但食管癌術(shù)后轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)率較高，5年總生存率依然較低。早期發(fā)現(xiàn)和治療可助于早期診斷食管癌和改善食管癌預(yù)后。因此，探索篩選新的有效的生物標(biāo)志物，對(duì)食管癌患者的診斷、治療具有重要的意義。
　　長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNAs，LncRNAs）是哺乳動(dòng)物基因組中非編碼RNA的主要成員，它們長(zhǎng)度超過(guò)200nt，缺乏完整的開(kāi)放閱讀框(ORF)，無(wú)蛋白編碼功能。雖然LncRNAs的轉(zhuǎn)錄本不能翻譯

3、成蛋白質(zhì)，但是LncRNAs在表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控、蛋白質(zhì)翻譯的過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。近年來(lái)，研究表明LncRNAs在癌癥中異常表達(dá)，發(fā)揮癌基因或抑癌基因的作用，參與癌細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移和自噬等多個(gè)方面。因此探索食管鱗癌相關(guān)LncRNAs已經(jīng)成為目前該研究領(lǐng)域的重要課題之一。
　　LncRNA BCYRN1(Brain Cytoplasmic RNA1，腦細(xì)胞質(zhì)RNA1)又稱(chēng)為BC200，位于人染色體

4、2p12上，由RNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄，長(zhǎng)度為200nt的LncRNA。既往研究認(rèn)為L(zhǎng)ncRNA BCYRN1作為翻譯調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)神經(jīng)元中的突觸樹(shù)突狀蛋白質(zhì)合成，多表達(dá)于于靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。近期研究顯示其在乳腺癌、肺癌、宮頸癌、卵巢癌、胃癌、食管癌、舌癌等癌組織中具有較高的表達(dá)豐度。盡管LncRNA BCYRN1在多種癌癥中異常表達(dá)，參與癌細(xì)胞的增殖、調(diào)亡、侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程，然而LncRNA BCYRN1在食管鱗癌中的表達(dá)及生物學(xué)

5、功能的研究較少。本研究旨在檢測(cè)LncRNA BCYRN1食管鱗癌中的表達(dá)水平及對(duì)其生物學(xué)功能的影響。
　　目的：
　　探討LncRNA BCYRN1在食管鱗癌中的表達(dá)水平及其生物學(xué)功能的影響。
　　方法：
　　1.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)LncRNA BCYRN1在接受根治術(shù)治療的66例ESCC患者癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)水平及其在食管鱗癌細(xì)胞株EC9706、Eca109和人食管上皮細(xì)胞系

6、Het-1A中的表達(dá)水平，并選取一株在其高表達(dá)的食管鱗癌細(xì)胞株作為后續(xù)的功能學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
　　2.應(yīng)用沉默LncRNA BCYRN1表達(dá)的慢病毒載體，感染食管鱗癌細(xì)胞系EC9706，并通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)LncRNA BCYRN1表達(dá)干擾后對(duì)食管鱗癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖、遷移、侵襲等腫瘤學(xué)行為的影響。
　　結(jié)果：
　　1.LncRNA BCYRN1食管鱗癌組織及細(xì)胞株EC97

7、06和Eca109表達(dá)水平升高。
　　2.MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組（感染空病毒載體，NC組）及空白對(duì)照組（MOCK組）相比，BCYRN1-shRNA感染后EC9706細(xì)胞增殖活性無(wú)明顯變化(P＞0.05);細(xì)胞劃痕和transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)表明:LncRNA BCYRN1表達(dá)干擾后EC9706細(xì)胞的遷徙及侵襲能力下降(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.LncRNA BCYRN1在食管鱗癌中組織中的表達(dá)