涉入小立碗蘚（Physcomitrella patens）干旱應(yīng)答蛋白質(zhì)的分離和鑒定.pdf

1、干旱是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要逆境因子，研究植物抗旱的分子機(jī)制，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)改善重要農(nóng)作物抗旱性能，已成為我國(guó)糧食生產(chǎn)中急需解決的重大課題。 苔蘚植物往往具有很強(qiáng)的抗旱能力，是研究植物抗旱分子機(jī)制的良好材料系統(tǒng)。小立碗蘚(Physcomitrella patens)是一種對(duì)干旱有著極強(qiáng)抵御能力的苔蘚。本研究從生理學(xué)入手，利用當(dāng)前最先進(jìn)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)，研究小立碗蘚干旱應(yīng)答蛋白的分離和鑒定問(wèn)題，提出植物干旱應(yīng)答中可能的新基因

2、和新蛋白，對(duì)闡明植物的抗旱機(jī)理具有重要的理論意義和實(shí)踐意義。 我們測(cè)定了在干旱處理及復(fù)水過(guò)程中的小立碗蘚的多個(gè)生理指標(biāo)，認(rèn)為POD活力、可溶性糖及游離脯氨酸含量的升高是小立碗蘚抗旱的生理證據(jù)。又通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)2-DE及最先進(jìn)的雙向熒光差異凝膠電泳(DIGE)技術(shù)，分別構(gòu)建了小立碗蘚莖葉體干旱處理3天及復(fù)水6天的蛋白質(zhì)組表達(dá)譜。與正常生長(zhǎng)條件下的小立碗蘚相比，發(fā)現(xiàn)70個(gè)上調(diào)/下調(diào)超過(guò)2倍的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。經(jīng)MALDI-TOF-TOF和N

3、anoLC-FT ICR MS/MS質(zhì)譜分析，數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，已鑒定其中8種蛋白為已知蛋白質(zhì)，而其余62個(gè)蛋白在現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫(kù)中未獲鑒定結(jié)果，應(yīng)為未知蛋白。8種已知蛋白質(zhì)的功能是：與植物抗逆相關(guān)的蛋白質(zhì)，如脫水蛋白，硫氧還蛋白過(guò)氧化酶；與細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白質(zhì)，如CDC48、FtsH同源物；以及分別與光合作用及呼吸作用相關(guān)的RuBisCO活化酶和NADH-泛醌氧化還原酶23kDa亞基；還有兩種目前未發(fā)現(xiàn)其具體功能的蛋白質(zhì)，如細(xì)胞內(nèi)病源相關(guān)蛋白類似物