不同區(qū)域鐵皮石斛成分差異分析與指紋圖譜建立研究.pdf

1、鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kiumra et Migo）是我國(guó)傳統(tǒng)中草藥，目前主要以莖入藥，為加強(qiáng)鐵皮石斛藥材資源的綜合利用與質(zhì)量控制，本研究以高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜、氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)結(jié)合多指標(biāo)成分定量分析的方法，對(duì)不同產(chǎn)地、不同部位、不同生長(zhǎng)時(shí)期的鐵皮石斛有效成分進(jìn)行了綜合系統(tǒng)的評(píng)價(jià)，同時(shí)建立了鐵皮石斛的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴采用頂空固相微萃取技術(shù)(HS-SP

2、ME)高效提取鐵皮石斛花、莖、葉中的揮發(fā)性成分，并以GC-MS技術(shù)測(cè)定各化合物，根據(jù)NIST11質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索匹配結(jié)果并結(jié)合保留指數(shù)RIs，共鑒定得到37種化合物，分為七大類(lèi):烷烴類(lèi)、烯烴類(lèi)、醛類(lèi)、醇類(lèi)、酮類(lèi)、酯類(lèi)化合物及其他，其中花中有30種化合物，葉中18種，莖中11種。鐵皮石斛花、莖、葉中有7種共有的化合物，分別為:十一烷、反-2-辛烯醛、長(zhǎng)葉烯、β-紫羅蘭酮、壬醛、癸醛和香葉基丙酮。從揮發(fā)性成分種類(lèi)分析，發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中成分種

3、類(lèi)豐富，β-紫羅蘭酮、香葉基丙酮、β-環(huán)檸檬醛、壬醛和癸醛這幾類(lèi)主要成分的含量較高，表明了鐵皮石斛葉片在揮發(fā)性成分上具有較大的研究利用價(jià)值。比較了安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康這四個(gè)產(chǎn)地的鐵皮石斛葉中揮發(fā)性成分，安徽霍山的鐵皮石斛葉片共有22種成分，種類(lèi)最為豐富。其次為浙江磐安，共有21種成分，浙江德清含有20種成分，浙江永康含有18種成分。四個(gè)產(chǎn)地的鐵皮石斛葉片共有14種共有的揮發(fā)性成分。⑵建立了鐵皮石斛HPLC指紋圖譜研究的

4、方法。結(jié)果顯示葉中化合物種類(lèi)和含量都明顯高于莖，這說(shuō)明鐵皮石斛葉具有較高的研究?jī)r(jià)值。在此基礎(chǔ)上，對(duì)7個(gè)產(chǎn)地（云南德宏、江西鷹潭、安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康、浙江麗水）11個(gè)批次的鐵皮石斛樣品的甲醇提取物進(jìn)行成分研究及比較，建立了11個(gè)批次鐵皮石斛葉片有效成分的指紋圖譜體系。共獲得21個(gè)共有色譜峰，并以其峰面積計(jì)算各產(chǎn)地鐵皮石斛樣品的相似性，浙江德清兩個(gè)批次樣品與對(duì)照?qǐng)D譜相似性較低，分別為0.639和0.654，其余六個(gè)產(chǎn)地的

5、樣品與對(duì)照?qǐng)D譜相似性較高，在0.816～0.954之間。聚類(lèi)分析結(jié)果顯示，云南德宏的鐵皮石斛被單獨(dú)聚為一類(lèi)，安徽霍山和浙江磐安聚為一類(lèi)，浙江其余三個(gè)產(chǎn)地和江西鷹潭聚為一類(lèi)。此外，通過(guò)主成分分析得到累積貢獻(xiàn)率達(dá)70.583％的三個(gè)主成分，其中峰8、9、10、14、15、16對(duì)主成分1貢獻(xiàn)率較高，峰1、2、4、5、20對(duì)主成分2貢獻(xiàn)率較高，峰11、12、13對(duì)主成分3貢獻(xiàn)率較高。鐵皮石斛葉和莖的甲醇提取物均有一定的抗氧化活性，且葉的抗氧化活

6、性高于莖。⑶對(duì)不同部位、不同產(chǎn)地的鐵皮石斛黃酮、多糖、生物堿含量進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中的黃酮含量明顯高于莖，不同產(chǎn)地之間，浙江永康的鐵皮石斛的總黃酮含量明顯高于其他產(chǎn)地，其次為安徽霍山和云南德宏。鐵皮石斛莖的多糖含量明顯高于葉，不同產(chǎn)地之間，浙江德清鐵皮石斛的總多糖含量最高，為51.453％。鐵皮石斛生物堿含量明顯低于黃酮和多糖，并且在葉中含量明顯高于莖，不同產(chǎn)地之間，浙江磐安的鐵皮石斛總生物堿含量最高，為0.0575％。鐵皮石