番石榴葉總黃酮對(duì)糖尿病小鼠肝臟胰島素信號(hào)通路及肝臟葡萄糖異生的調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、背景：隨著全球經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活方式的改變，整個(gè)世界糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)的患病率持續(xù)上升。據(jù)2011年國際DM聯(lián)盟（IDF）最新數(shù)據(jù)，截止2011年全世界DM患病人數(shù)已達(dá)3.66億，預(yù)計(jì)到2030年,全球成人DM患病人數(shù)將增加到5.22億[1]。DM是由多種原因引起的以慢性高血糖為特點(diǎn)的代謝紊亂性疾病，并且伴有因胰島素（Insulin,INS）分泌缺陷引起的糖、脂和蛋白質(zhì)代謝異常。1型DM以INS分泌絕對(duì)

2、不足為主；2型DM以INS抵抗為主，伴INS分泌相對(duì)不足；長期持續(xù)的高血糖會(huì)導(dǎo)致廣泛的周圍組織和器官損害[2]。繼腫瘤、心血管病之后，DM已成為第三大嚴(yán)重威脅人類健康的慢性疾病。目前西醫(yī)臨床主要采用口服降糖藥和INS強(qiáng)化治療的方式來延緩DM發(fā)展，但這些藥物有時(shí)還是無法達(dá)到預(yù)期的治療效果，且存在多種副作用，對(duì)損傷的胰島也沒有保護(hù)作用。所以尋找一種控制血糖的簡便易行、安全可靠的方法，對(duì)DM的預(yù)防和治療十分重要。番石榴葉（Psidium gu

3、ajava L）為桃金娘科番石榴屬植物，近年來的研究顯示番石榴葉具有較好的抗DM作用,但其作用機(jī)制研究尚不廣泛深入。本文研究番石榴葉總黃酮提取物降血糖作用及其機(jī)制，為開發(fā)新的降糖藥物提供參考依據(jù)。目的：研究番石榴葉總黃酮提取物對(duì)DM小鼠肝臟葡萄糖代謝、胰島素信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)、肝臟葡萄糖異生的調(diào)控機(jī)制及對(duì)胰島的保護(hù)作用，探索其降糖作用機(jī)制。
　　方法：雄性BALB/c小鼠，腹腔注射鏈脲佐菌素（Streptozocin,STZ）6

4、0 mg.kg-1連續(xù)5 d后，血糖儀檢測(cè)空腹血糖水平，以連續(xù)3d空腹血糖濃度>11.1mmol.L-1為糖尿病模型成功標(biāo)準(zhǔn)。DM小鼠隨機(jī)分為模型組和番石榴葉總黃酮提取物治療組，每組10只，另設(shè)10只正常對(duì)照小鼠。治療組劑量以相當(dāng)于生藥16.5g kg-1.d-1番石榴葉總黃酮提取物灌胃，正常組和模型組以等體積蒸餾水灌胃，2周后測(cè)其空腹血糖、體重、Elisa測(cè)其血清胰島素(INS)水平、病理觀察胰島數(shù)目及形態(tài)學(xué)改變、免疫組化觀察胰島素分

5、泌量、熒光PCR法檢測(cè)肝葡萄糖激酶（glucokinase， GK）、葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白（glucokinase regulatory protein,GKRP）、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（glucose transporter2，GLUT-2）、胰島素生長因子-1(insulin growth factor-1,IGF-1)、胰島素受體底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)、胰島素受體底物-2(in

6、sulin receptor substrate-2,IRS-2)和糖異生酶葡萄糖-6-磷酸酶（glucose-6-phosphatase， G-6-pase)與磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（phosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK)表達(dá)；Western blot測(cè)肝臟葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（glucose transporter2，GLUT2）的表達(dá)。
　　結(jié)果：與正常組比，模型組小鼠體重明顯降低（P

7、<0.01），血糖明顯升高（P<0.01）；胰島周圍胰島素（INS）分泌量和血清胰島素(INS)分泌量均明顯下降；胰島變性明顯，胰島數(shù)目明顯減少、體積變小、甚至消失；肝GK，GLUT2， IGF-1，IRS-1和IRS-2表達(dá)下降，GKRP，G-6-pase和PEPCK表達(dá)升高，Western blot顯示肝GLUT2表達(dá)降低。與模型組比，番石榴葉總黃酮治療組血糖明顯降低（P<0.05），胰島周圍和血清胰島素(INS)分泌均增多；胰島數(shù)