半滑舌鰨仔稚魚(yú)營(yíng)養(yǎng)生理與開(kāi)口飼料的開(kāi)發(fā)研究.pdf

1、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)屬鰈形目(PleuroIlecti formes)、舌鰨科(Cynoglossidae)、舌鰨屬(Cynoglossus BLmharlan-Hamiltou)，為我國(guó)近海底層的大型名貴經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)。生長(zhǎng)速度快，肉味鮮美，深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)，有著廣闊的發(fā)展前景。但是在苗種生產(chǎn)過(guò)程中，從生物餌料轉(zhuǎn)為配合餌料期間，仍會(huì)出現(xiàn)大量的死亡，轉(zhuǎn)餌問(wèn)題成為限制其擴(kuò)大再生產(chǎn)的一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題，微顆粒飼料

2、的研制仍是難點(diǎn)所在。為了促進(jìn)半滑舌鰨養(yǎng)殖的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，本文開(kāi)展了半滑舌鰨仔稚魚(yú)營(yíng)養(yǎng)生理和開(kāi)口飼料的開(kāi)發(fā)研究，旨在為了解半滑舌鰨不同發(fā)育階段的營(yíng)養(yǎng)需求，及其高效開(kāi)口飼料的研制提供理論依據(jù)?，F(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)如下： (1)利用形態(tài)學(xué)和連續(xù)組織切片技術(shù)，對(duì)出膜后1～30d的半滑舌鰨消化系統(tǒng)胚后發(fā)育的組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行了系統(tǒng)觀察和研究。研究表明，試驗(yàn)水溫為20.0～22.O℃時(shí)，孵化后第3d，仔魚(yú)開(kāi)口攝食，消化道上皮細(xì)胞出現(xiàn)分化，肝臟和胰臟開(kāi)

3、始出現(xiàn)，魚(yú)體開(kāi)始由內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)向外源性營(yíng)養(yǎng)。孵化后第5d，卵黃囊完全被吸收，消化道明顯分化成口咽腔、食道、胃、前腸和后腸，仔魚(yú)消化系統(tǒng)具備了攝食和消化外源性食物的能力。此后隨著魚(yú)體的生長(zhǎng)，粘膜層的褶皺增加，消化道上皮細(xì)胞進(jìn)一步分化，腸道分段、盤(pán)旋，消化系統(tǒng)從功能和結(jié)構(gòu)上逐步地完善成熟。開(kāi)口攝食之后，先后發(fā)現(xiàn)在后腸出現(xiàn)嗜曙紅顆粒，在前腸出現(xiàn)空泡，表明腸上皮細(xì)胞吸收了蛋白質(zhì)和脂肪。繼而糖元在肝臟中不斷地儲(chǔ)存。在出膜后第23天，出現(xiàn)胃腺，標(biāo)志

4、著稚魚(yú)期的開(kāi)始。 (2)對(duì)半滑舌鰨不同發(fā)育階段主要消化酶(酸性蛋白酶、堿性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)以及與消化吸收相關(guān)的堿性磷酸酶的活性變化進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，半滑舌鰨在仔魚(yú)發(fā)育早期即可檢出酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的活力，堿性蛋白酶的2個(gè)極低值分別出現(xiàn)在仔魚(yú)開(kāi)口期和仔稚魚(yú)的轉(zhuǎn)變期，酸性蛋白酶的活性從孵化后23 d左右，胃腺出現(xiàn)時(shí)開(kāi)始明顯升高。早期仔魚(yú)體內(nèi)表現(xiàn)出較強(qiáng)的淀粉酶活性，孵化后12 d其活性急劇下降，并一直保持較低的比活力狀

5、態(tài)。脂肪酶的活性在半滑舌鰨早期仔魚(yú)體內(nèi)一直較低，進(jìn)入稚魚(yú)期后開(kāi)始緩慢上升。堿性磷酸酶活性在變態(tài)結(jié)束后出現(xiàn)大幅度的升高，這標(biāo)志著腸組織結(jié)構(gòu)和腸道消化功能的完善。 (3)分別在孵化后第3d(對(duì)照組)、延遲1d(D1組)、延遲2d(D2組)和延遲3d(D3組)投喂輪蟲(chóng),探討延遲投餌對(duì)半滑舌鰨仔魚(yú)生長(zhǎng)、存活和體成分的影響。實(shí)驗(yàn)水溫21～22℃,鹽度為31.00,試驗(yàn)周期為15d。結(jié)果顯示,仔魚(yú)于孵出后第3d進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期,從第4d開(kāi)始加

6、速生長(zhǎng),第5d進(jìn)入外源性營(yíng)養(yǎng)期。延遲投餌2d,會(huì)使仔魚(yú)的干重、粗蛋白和粗脂肪的含量明顯的低于對(duì)照組(p<0.05)。隨著投餌天數(shù)的延遲,仔魚(yú)的存活率隨之降低。在仔魚(yú)開(kāi)口后4d內(nèi),各組死亡率差異不大;開(kāi)口后第6d(孵化后第8d),仔魚(yú)死亡率呈現(xiàn)明顯差異。在孵化后第10d,延遲投餌3d的仔魚(yú)接近完全死亡。仔魚(yú)的饑餓試驗(yàn)分為饑餓和正常投喂兩個(gè)處理組,每組500尾(各設(shè)2個(gè)平行),分別在孵化后一直不投餌,和在孵化后第3d開(kāi)始投喂輪蟲(chóng)。試驗(yàn)結(jié)果表

7、明:仔魚(yú)的混合營(yíng)養(yǎng)期持續(xù)2d;孵化后第8d開(kāi)始,饑餓仔魚(yú)的全長(zhǎng)和干重明顯地低于攝食仔魚(yú)(p<0.05)。饑餓仔魚(yú)在孵化后第11d全部死亡,攝食仔魚(yú)的成活率為35[％]。攝食仔魚(yú)的攝食率在孵化后10d達(dá)到100[％],饑餓仔魚(yú)的攝食率在孵化后4d達(dá)到最大值為63.44[％],在孵化后6d降為36.89[％],因此,半滑舌鰨仔魚(yú)初次攝食期耐受饑餓的時(shí)間臨界點(diǎn)即PNR發(fā)生在孵化后第6～7d。 (4)測(cè)定了半滑舌鰨(Cynoglossu

8、s semitaevis)早期發(fā)育階段的生化組成、氨基酸和脂肪酸組成的變化。在不同發(fā)育階段,蛋白質(zhì)和脂肪含量都沒(méi)有顯著性差異,但是灰分含量從受精卵到卵黃囊仔魚(yú)有明顯地降低。從受精卵發(fā)育到卵黃囊仔魚(yú),氮的含量保持不變,而氫和碳的含量則顯著下降。碳/氮的比例在早期發(fā)育階段呈下降趨勢(shì)。總氨基酸組成在受精卵和卵黃囊仔魚(yú)之間變化明顯,但是在卵黃囊仔魚(yú)和開(kāi)口仔魚(yú)之間只有細(xì)微的變化。開(kāi)口仔魚(yú)的總必需氨基酸組成與攝食的輪蟲(chóng)的總必需氨基酸組成之間有很高的

9、相關(guān)性,這表明開(kāi)口仔魚(yú)的餌料的氨基酸組成平衡。半滑舌鰨受精卵的游離氨基酸含量很高,為139 mgg<'-1>。干重,占總氨基酸含量的22.3[％]。但是卵黃囊仔魚(yú)的游離氨基酸含量急劇下降,僅為3.6mg g<'-1>,發(fā)育到開(kāi)口仔魚(yú)含量沒(méi)有進(jìn)一步變化,為2.5mg g<'-1>。這些變化說(shuō)明游離氨基酸在半滑舌鰨發(fā)育早期參與了重要的代謝活動(dòng)。飽和脂肪酸的總量從受精卵到卵黃囊仔魚(yú)明顯下降,但是發(fā)育到開(kāi)口仔魚(yú)含量無(wú)顯著變化。單不飽和脂肪酸和多

10、不飽和脂肪酸的總量在不同發(fā)育階段無(wú)顯著變化,而EPA和DHA的含量從卵黃囊仔魚(yú)到開(kāi)口仔魚(yú)有明顯下降。這表明在早期發(fā)育階段半滑舌鰨主要利用飽和脂肪酸作為能量代謝的基質(zhì)，對(duì)飽和脂肪酸的利用程度大于單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。半滑舌鰨似乎需要長(zhǎng)鏈的多不飽和脂肪酸如EPA和DHA，因?yàn)闆](méi)有發(fā)現(xiàn)可以從它們的前體進(jìn)行生物合成來(lái)獲得。在發(fā)育過(guò)程中ARA的含量保持不變，有可能表明半滑舌鰨對(duì)ARA也有需求。 (5)以孵化后20d的半滑舌鰨仔魚(yú)

11、為研究對(duì)象，采用4種不同的動(dòng)物蛋白源制成等氮等能的4組微顆粒飼料，分別為：(1)魚(yú)粉組(FM組)；(2)蝦粉組(SM組)；(3)貽貝粉組(MM組)；(4)魚(yú)蛋白水解物組(FPH組)，進(jìn)行21d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，探討飼料中不同蛋白源對(duì)半滑舌鰨仔魚(yú)生長(zhǎng)和存活的影響。試驗(yàn)共進(jìn)行2ld，水溫保持在21±1℃，每隔7d取樣一次，測(cè)定魚(yú)體的干重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，各組的成活率沒(méi)有顯著性差異。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，F(xiàn)PH組仔魚(yú)的體重明顯地高于MM組(p<0.05)，但是

12、與FM組和SM組之間則沒(méi)有明顯的差異。FPH組仔魚(yú)在生長(zhǎng)和存活率方面都有良好的表現(xiàn)，但是除了體重之外，其它指標(biāo)與其它組相比沒(méi)有顯著性差異。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)除了MM組的粗蛋白含量明顯低于其它組之外，各組試驗(yàn)魚(yú)的粗蛋白和粗脂肪含量都沒(méi)有明顯的差異。本研究結(jié)果認(rèn)為魚(yú)蛋白水解物和魚(yú)粉是半滑舌鰨仔魚(yú)適宜的蛋白源，可以保證其生長(zhǎng)和成活。 (6)用活餌料(鹵蟲(chóng))、添加不同劑量消化酶的微顆粒飼料來(lái)投喂孵化后20d的半滑舌鰨仔魚(yú)，飼育25天后添加消化酶

13、組的仔稚魚(yú)體重明顯高于未添加組(p<0.05)，但是低于活餌料組(p<0.05)，活餌料組的成活率明顯高于微顆粒飼料組(p<0.05)。除堿性磷酸酶以外，不同餌料對(duì)仔稚魚(yú)的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性都沒(méi)有影響。 (7)探討了活餌料和配合飼料聯(lián)合投喂對(duì)半滑舌鰨轉(zhuǎn)餌的影響。半滑舌鰨仔魚(yú)的養(yǎng)殖水溫為21±1℃，從孵化后第6d開(kāi)始試驗(yàn)，采用4種投喂方案，分別是：A為投喂鹵蟲(chóng)，投喂量為10 individuals mL<'-1>；B為投

14、喂鹵蟲(chóng)，投喂量為5individuals mL<'-1>；C為混合餌料，投喂鹵蟲(chóng)10 individuals mL<'-1>和配合飼料1 2 mgL<'-1>；D為混合餌料，投喂鹵蟲(chóng)5 individualsmL<'-1>q和配合飼料12 mgL<'-1>在試驗(yàn)開(kāi)始的第一周，各組還同時(shí)投喂輪蟲(chóng)。結(jié)果顯示，將配合飼料和活餌料(輪蟲(chóng)和鹵蟲(chóng))混合投喂，可以使仔魚(yú)完成變態(tài)，特定生長(zhǎng)率分別為18.5±1．4％和18.7±1.6％，成活率分別為40

15、±7.6％和48.5±6.8％，達(dá)到與單獨(dú)投喂活餌料相似的結(jié)果(特定生長(zhǎng)率分別為18.3±1.2％和19.3±1.9％，成活率分別為41.2±11.3％和38±4.9％)。 然而，在孵化后第31d開(kāi)始轉(zhuǎn)餌，直至完全投喂配合飼料，各實(shí)驗(yàn)組的生長(zhǎng)和存活率之間存在顯著的差異。在孵化后第60d斷餌試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，在仔魚(yú)階段進(jìn)行聯(lián)合投喂的兩組魚(yú)的成活率相近，C組為62.1±7.6％，D組為62.8±3.9％，顯著高于單獨(dú)投喂活餌料的A組(49