固定酶的苯乙烯整體柱微芯片分析系統(tǒng)研究.pdf

1、論文在綜述國內外各種微流控芯片酶反應分析系統(tǒng)的基礎上，對比多種微流控芯片酶反應分析系統(tǒng)的特點，選定固定酶的苯乙烯整體柱芯片分析系統(tǒng)，隨后對該分析系統(tǒng)進行了應用研究。
　　首先，以苯乙烯功能單體、二乙烯基苯交聯劑、無水乙醇致孔劑及偶氮二異丁腈（AIBN）為引發(fā)劑，采用紫外引發(fā)法，制備了反相聚苯乙烯整體柱材料；為了滿足其用于酶固定的要求，采用硫酸磺化改性獲得了陽離子聚苯乙烯整體柱材料。用掃描電鏡法、紅外光譜法等手段表征了該材料的形貌結

2、構和特性，并在溶液過柱流速小于1.5mL/min時，測得長為10mm,直徑為1mm的改性聚苯乙烯整體柱對L-Tyr樣品的最大吸附量約為3.4mg，柱容量約為0.43mg/mm3，并具有良好的機械穩(wěn)定性。
　　GOD酶在聚苯乙烯介質材料上進行固定，在規(guī)格為長20mm、直徑1mm聚苯乙烯整體柱上，用對苯醌紫外檢測的方法測定，當使用的游離酶為10U時，GOD酶的固定量約為7U，，酶的固定效率可達70％。
　　在微流控芯片管路中，實

3、現了聚苯乙烯整體柱的原位聚合和磺化改性，在改性后的聚苯乙烯整體柱上固定了HRP酶，確定了HRP酶在酶濃度5μg/mL和過柱速度0.2mL/min時，固定效果良好，以此構建了固定酶的苯乙烯整體柱微反應芯片分析系統(tǒng)。
　　將該微反應芯片分析系統(tǒng)與化學發(fā)光檢測方式結合，建立了固定酶整體柱微反應芯片－化學發(fā)光檢測方法。化學發(fā)光優(yōu)化實驗發(fā)現樣品過片流速為0.2mL/min、發(fā)光試劑與樣品的體積比為1：1時，可以達到最佳的化學發(fā)光檢測效果。用