全內(nèi)反射同步熒光法研究界面吸附行為及其應(yīng)用.pdf

1、卟啉具有重要的生物物理化學(xué)作用，它能與蛋白質(zhì)相互作用并吸附到細(xì)胞膜表面，因此卟啉和蛋白質(zhì)在界面上相互作用的研究具有重要的意義。全內(nèi)反射熒光技術(shù)是目前在單分子水平上研究界面的一種有效方法，同步熒光技術(shù)具有提高選擇性、簡(jiǎn)化光譜等優(yōu)點(diǎn)；將上述兩種技術(shù)相結(jié)合，可有效地減少界面散射光的干擾，并窄化界面熒光光譜。本文應(yīng)用全內(nèi)反射同步熒光技術(shù)研究水溶性卟啉與牛血清蛋白以及不同表面活性劑在界面上的吸附及應(yīng)用。論文分為如下四章： 第一章簡(jiǎn)要介紹了

2、全內(nèi)反射熒光法的原理以及特點(diǎn)，并比較了一些目前已有的界面研究方法的優(yōu)缺點(diǎn)。對(duì)目前全內(nèi)反射熒光法在蛋白質(zhì)的固-液界面吸附的應(yīng)用，以及液-液界面吸附研究做了綜述，同時(shí)介紹了卟啉與蛋白質(zhì)界面化學(xué)的研究狀況。 第二章建立了利用蛋白質(zhì)吸附在液－固界面上的同步熒光信號(hào)隨本體溶液濃度的增加呈線性關(guān)系，定量測(cè)定本體蛋白質(zhì)溶液濃度的新方法。應(yīng)用全內(nèi)反射同步熒光法研究了以meso-四（4－磺酸基苯基）卟啉（TPPS）標(biāo)記牛血清蛋白（BSA）在石英親

3、水界面上的吸附?？疾炝藱z測(cè)時(shí)間、pH值、離子強(qiáng)度以及TPPS濃度等影響蛋白質(zhì)界面吸附的因素，檢測(cè)限是94 μg/L。該法用于實(shí)際人血清蛋白樣品的測(cè)定，得到令人滿意的結(jié)果。第三章應(yīng)用全內(nèi)反射同步熒光技術(shù)研究了不同的表面活性劑對(duì)TPPS在正己烷/水界面上吸附的影響。比較了TPPS在界面上與在水相中熒光性質(zhì)的差異，研究了全內(nèi)反射同步熒光強(qiáng)度隨表面活性劑種類、表面活性劑濃度及溶液pH值的變化情況，探索了TPPS的界面吸附行為。在陽離子表面活性劑

4、中，TPPS在界面上有較強(qiáng)的吸附；而在陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑存在或無表面活性劑存在的情況下TPPS則在界面的吸附很微弱；并著重考察了陽離子表面活性劑CTAB對(duì)TPPS界面熒光性質(zhì)的影響。界面上的熒光光譜與未質(zhì)子化的TPPS（TPPS4-）相近，但紅移8-9nm；結(jié)果說明，不論表面活性劑存在與否，TPPS4-能夠選擇性地吸附在正己烷/水界面上，但在陽離子表面活性劑中，TPPS4-在液-液界面的吸附能力最大。研究顯示在陽離子和陰

5、離子表面活性劑中，靜電力在TPPS界面吸附過程中應(yīng)起重要作用。 第四章應(yīng)用全內(nèi)反射同步熒光技術(shù)研究蛋白質(zhì)與卟啉在甲苯－水界面的相互作用。 首先考察了pH對(duì)不同濃度體系中BSA與TPPS結(jié)合的影響，在BSA和TPPS濃度比較高(1.0×10-5mol/L)的體系中，BSA與TPPS強(qiáng)烈結(jié)合，pH對(duì)二者結(jié)合不產(chǎn)生影響；而在濃度較低體系(1.0×10-7mol/L)中，pH對(duì)BSA和TPPS的結(jié)合有著決定性的影響。 其

6、次建立了現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)油-水雙相體系的技術(shù)，考察BSA與TPPS在水相、界面以及油相的分配和型體特征，得到CBSA，CTPPS均為1.0×10-6mol/L的體系中，界面吸附量為1.1×10-10mol/cm2。并對(duì)卟啉在不同環(huán)境中的熒光光譜進(jìn)行比較，證明：油-水界面極性與非極性的有機(jī)相接近；BSA與TPPS結(jié)合后，BSA為TPPS提供了類似非極性的微環(huán)境。 進(jìn)一步考察了不同的BSA與TPPS濃度比例對(duì)本體和界面熒光特征光譜影響，在一